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C6细胞热休克蛋白抗原肽复合物的提纯及抑瘤作用的研究
目的提纯大鼠脑胶质瘤C6细胞热休克蛋白抗原肽复合物(HAC),免疫SD大鼠,观察HAC的抑瘤作用.方法采用免疫亲和层析方法提纯大鼠脑胶质瘤C6细胞HAC,免疫20只大鼠为实验组,以另20只大鼠作为对照组,于免疫后1周,采用立体定向脑内接种方法,以C6细胞攻击两组大鼠,于肿瘤细胞攻击后第二周,取两组动物外周静脉血,测定外周静脉血淋巴细胞计数,并应用流式细胞仪技术测定外周血中CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞的比例.观察饲养过程中实验动物出现的症状、体征和第四周实验动物存活率.于第四周处死存活动物,取脑组织进行HE染色病理组织学检查,并用免疫组化方法分析脑胶质瘤浸润区T淋巴细胞分布情况.结果实验组大鼠外周血淋巴细胞计数显著高于对照组(P＜0.01),CD3+CD4+和CD3+CD8+T淋巴细胞的比例实验组均显著高于对照组(P＜0.01).实验组动物症状出现时间显著晚于对照组动物(P＜0.01),实验组动物第四周末存活率显著高于对照组(P＜0.05).实验组胶质瘤局部浸润的CD3+和CD4+细胞数均显著高于对照组(P＜0.01),实验组胶质瘤局部浸润的CD8+细胞数与对照组比较无显著差异(P＞0.05),实验组胶质瘤局部浸润T淋巴细胞CD4+/CD8+显著高于对照组(P＜0.01).结论C6细胞中HAC可以诱导大鼠产生对C6细胞的细胞免疫,提高大鼠存活率.
关键词： 热休克蛋白抗原肽复合物 胶质瘤 免疫治疗 -
小鼠B16黑色素瘤细胞HACs的提纯及其抑瘤作用和机理的探讨
目的:从小鼠B16黑色素瘤细胞胞浆中提纯热休克蛋白抗原肽复合物(heatshockprotein antigenpeptidecomplexes ,HACs),并观察其抑瘤作用及探索其机制.方法:CNBr Sepharose 4B亲和层析法提纯B16HACs,应用体内免疫法检测HAC的抑瘤作用 ,结晶紫染色法检测γ IFN分泌活性,ConA诱导的淋巴母细胞增殖法检测IL 2分泌活性,3H TdR掺入法检测特异性CTL的杀伤活性.结果:亲和层析法获得的HAC60、HAC75和HAC97免疫小鼠后 ,小鼠移植肿瘤的发生率降低,肿瘤平均出现时间延迟,平均肿瘤重量明显减轻;小鼠脾细胞的γ IFN和IL 2分泌活性增强,特异性CTL的杀伤活性增强.结论:经亲和层析纯化的HACs 可通过增强免疫功能的机制抑制小鼠移植肿瘤的生长,并为制备肿瘤疫苗提供实验依据.
关键词： 黑色素瘤 热休克蛋白抗原肽复合物 亲和层析法 免疫功能 抑瘤作用 -
脑胶质瘤热休克蛋白抗原肽复合物抑瘤作用的研究
目的提纯大鼠脑胶质瘤C6细胞热休克蛋白抗原肽复合物(HAC),免疫大鼠,观察HAC的抑瘤作用.方法采用免疫亲和层析方法提纯鼠脑胶质瘤C6细胞HAC,免疫20只大鼠为实验组,以另20只大鼠作为对照组,于免疫后一周,采用立体定向脑内接种方法,以C6细胞攻击两组大鼠,于肿瘤细胞攻击后第二周,进行外周静脉血淋巴细胞计数,和血清INF、IL-2、TNF的浓度测定,并于正常对照.观察四周后动物的存活率.进行HE染色,并用免疫组化方法分析脑胶质瘤浸润区T淋巴细胞分布情况.结果实验组大鼠外周血淋巴细胞计数和IFN、IL-2、TNF浓度均显著高于对照组(P＜0.01).实验组胶质瘤局部浸润的CD3+和CD4+细胞数均显著高于对照组(P＜0.01),CD8+细胞数与对照组比较无显著差异(P＞0.05),T淋巴细胞CD4+/CD8+显著高于对照组(P＜0.01).结论 C6细胞中HAC可以诱导大鼠产生对C6细胞的细胞免疫,抑制肿瘤生长,提高接种大鼠存活率.
关键词： 热休克蛋白抗原肽复合物 胶质瘤 免疫治疗 -
C6细胞热休克蛋白抗原肽复合物提纯及抑瘤作用研究
目的提纯大鼠脑胶质瘤C6细胞热休克蛋白抗原肽复合物(HAC),免疫SD大鼠,观察HAC的抑瘤作用.方法采用免疫亲和层析方法提纯大鼠脑胶质瘤C6细胞HAC,免疫20只大鼠为实验组,以另20只大鼠作为对照组,于免疫后1 w,采用立体定向脑内接种方法,以C6细胞攻击两组大鼠,于肿瘤细胞攻击后第二周,取两组动物外周静脉血,测定外周静脉血淋巴细胞计数,并应用流式细胞仪技术测定外周血中CD3+/CD4+和CD3+/CD8+T淋巴细胞的比例.观察饲养过程中实验动物出现的症状、体征和第四周实验动物存活率.于第四周处死存活动物,取脑组织进行HE染色病理组织学检查,并用免疫组化方法分析脑胶质瘤浸润区T淋巴细胞分布情况.结果实验组大鼠外周血淋巴细胞计数显著高于对照组(P＜0.01),CD3+/CD4+和CD3+/CD8+T淋巴细胞的比例实验组均显著高于对照组(P＜0.01).实验组动物症状出现时间显著晚于对照组动物(P＜0.01),实验组动物四周末存活率显著高于对照组(P＜0.05).实验组胶质瘤局部浸润的CD3+和CD4+细胞数均显著高于对照组(P＜0.01),实验组胶质瘤局部浸润的CD8+细胞数与对照组比较无显著差异(P＞0.05),实验组胶质瘤局部浸润T淋巴细胞CD4+/CD8+显著高于对照组(P＜0.01).结论C6细胞中HAC可以诱导大鼠产生对C6细胞的细胞免疫,提高大鼠存活率.
关键词： 胶质瘤 免疫治疗 热休克蛋白抗原肽复合物
