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G2+M期阻滞文献资料
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RNA干扰抑制UHRF1基因表达对食管癌细胞放射增敏作用的研究
目的 研究RNA干扰抑制UHRF1表达对食管癌细胞系(TE-1)放射敏感性的影响及作用机制.方法 以慢病毒感染方法将UHRF1基因的短发夹状RNA (shRNA)转入TE-1细胞,并分为未转染组、转染NC-shRNA组、转染UHRF1-shRNA组,前二者为对照组.采用RT-PCR和蛋白印记法检测转染前后细胞UHRF1的mRNA和蛋白表达,成克隆法、流式细胞术及蛋白印记法检测转染UHRF1-shRNA联合X线照射对TE-1细胞放射敏感性、周期、凋亡及DNA损伤标识蛋白γ-H2 AX的影响.结果 转染UHRF1-shRNA后TE-1细胞UHRF1的mRNA和蛋白表达受抑(0.11、0.96、0.98,F=124.21,P=0.000;0.10、0.89、0.94,F=125.25,P=0.000).X线照射后转染UHRF1-shRNA组放射增敏比分别为1.53(D0值比)和1.95(Dq值比).X线照射可引起TE-1细胞G2+M期阻滞、凋亡率和γ-H2 AX表达增加,与对照组相比转染UHRF1-shRNA组照后24的G2 +M期阻滞显著降低(F=500.15,P=0.000)、凋亡率和γ-H2 AX残存量明显升高(F=100.10、61.00,P=0.000、0.000).结论 RNA干扰可有效抑制TE-1细胞UHRF1表达,增强细胞放射敏感性,其增敏机制与周期调控、凋亡及DNA损伤修复有关.
