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绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因 LTBP1 mRNA的表达研究
目的：研究绝经后骨质疏松症肾阳虚证的关联基因 LTBP1及PCSK6的mRNA表达水平，探讨绝经后骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1及PCSK6基因表达的关联性。方法随机选择绝经后骨质疏松症患者，中医辨证肾阳虚证组25例，32例健康绝经后妇女为对照组，RT-PCR法检测外周血LTBP1及PCSK6 mRNA的表达。结果肾阳虚证组LTBP1 mRNA表达水平低于健康对照组（F＝7.473，P＝0.008），差异有统计学意义；肾阳虚证组PCSK6 mRNA表达水平较健康对照组比较，有降低趋势，但差异无统计学意义；通过GO分析参与到的生物途径有细胞外组织形成、代谢过程、磷酸化作用、蛋白磷酸化、TGF-β的细胞外基质合成、BMP信号通路、细胞分泌等；通过Pathway分析参与到弹性纤维形成、细胞外基质组织、整合胰腺癌的通路、TGF-β信号通路、发育生物学、神经生长因子信号转导等通路相关。结论骨质疏松症肾阳虚证与LTBP1基因表达下调相关联。
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siRNA 沉默 PCSK6基因对胶原诱导性关节炎的影响
目的：探讨 siRNA 沉默 PCSK6基因对胶原诱导性关节炎（CIA）成纤维样滑膜细胞（FLS）生物学行为的影响。方法采用牛Ⅱ型胶原诱导大鼠 CIA 模型，取膝关节滑膜组织原代培养 FLS；采用人工合成的 siRNA oligo-433干扰剂、siRNA oligo-688干扰剂、siRNA oligo-2506干扰剂特异性抑制 PCSK6在 CIA FLS 中的表达，阴性siRNA为阴性对照组，瞬时转染24、36 h 后，采用 RT-qPCR 法检测抑制效率，同时检测 PCSK6基因沉默后各相关基因的表达；采用 MTT、Transwell、细胞划痕、流式细胞术、ELISA 等方法检测干扰 PCSK6表达后对细胞增殖、侵袭、迁移、细胞周期和相关炎性因子分泌的影响。结果转染特异性 siRNA-PCSK6后，各干扰组与阴性对照组相比，siRNA oligo-2506干扰剂转染24 h 时，PCSK6 mRNA 水平抑制效果显著（P ＜0．001），CIA FLS 的增殖受到抑制（P ＜0．001），细胞的侵袭和迁移能力下降（P ＜0．001），肿瘤坏死因子α（TNF-α）和白细胞介素-1β（IL-1β）分泌降低（P ＜0．001），G0／G1期的细胞数目增多（P ＜0．05），PCSK6下游基因 CXCL9、MMP2、MMP9、NOSTRIN、HIF-1α、MPZL2、IGF2、PADI4表达均明显下降（P ＜0．05）。结论PCSK6基因沉默对 CIA FLS 的生物学行为具有一定作用，为进一步研究 CIA 发病机制奠定基础。
