您当前的位置：
首页 > 文献资料
所属专业：
PTHrp蛋白和mRNA表达文献资料
-
PTHrP基因靶向RNA干扰重组表达质粒的构建鉴定以及在HTB-94细胞中的功能检测
目的 构建针对目的 基因PTHrp的pSileneer3.1-Hl neo siRNA(small interfering RNA)表达质粒,并在人体软骨肉瘤细胞HTB-94中观察其干扰效果.方法 设计并合成针对PTHrP基因编码区的含有发卡结构的互补的寡核苷酸链,体外退火后克隆入经B amH I, HindⅢ双酶切线性化的干扰载体pSilencerTM 3.1H1 neo中,对重组质粒进行酶切分析和DNA系列测定.结果 双酶切证实PTHrP siRNA表达质粒克隆构建成功,插入片段测序结果与合成的siRNA结果一致,同时干扰了PTHrP基因的mRNA和蛋白的表达.结论 成功构建的靶向RNA干扰重组表达质粒,可以通过小RNA序列干扰靶向基因的mRNA转录,降低靶向基因在细胞中mRNA和蛋白的表达.
