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非对称性二甲基精氨酸通过Rho/ROCK信号通路介导大鼠血管平滑肌细胞迁移
目的 探讨非对称性二甲基精氨酸(Asymmetric Dimethylarginine,ADMA)对血管平滑肌细胞(vascular smooth muscle cells,VSMCs)迁移和形态变化的影响,并探索Rho/ROCK和MAPK信号转导通路在其中的作用.方法 原代培养大鼠VSMCs,并通过转染二甲基精氨酸二甲胺水解酶hDDAH2过表达载体,L-精氨酸(1mM)或ROCK抑制剂Y27632等预处理,观察细胞RhoA蛋白与底物rhotekin蛋白结合程度,ROCK底物MYPT-1磷酸化程度、VSMC迁移能力和细胞骨架及黏着斑定位情况.结果 (1) ADMA诱导平滑肌细胞Rho/ROCK信号转导通路；(2) Rho/ROCK和ERK信号通路交联介导ADMA对平滑肌细胞迁移能力的诱导作用;(3) ADMA通过Rho/ROCK诱导平滑肌细胞骨架无序排列、黏着斑定位改变;(4)L-精氟酸对上述变化有逆转作用.结论 ADMA通过Rho/ROCK和ERK1/2信号交联诱导VSMC迁移和表型转化,而L-精氨酸逆转ADMA引起的改变.
关键词： 非对称性二甲基精氨酸(ADMA) 血管平滑肌细胞 表型转化 Rho激酶 迁移 -
氯沙坦通过降低ADMA水平诱导血管内皮保护作用
目的 本实验拟观察在培养的人脐静脉内皮细胞,氯沙坦对血管紧张素Ⅱ(Ang Ⅱ)诱导的血管内皮活化的保护作用是否与降低非对称二甲基精氨酸(ADMA)水平有关.方法 用不同浓度的AngⅡ(10-9～10-6 mol·L-1)孵育不同时间(6～48 h),并加入不同浓度的氯沙坦(1、3、10 μmol·L-1)预处理1 h,检测细胞培养上清液中的ADMA、一氧化氮(NO)、肿瘤坏死因子(TNF-α)水平,细胞中蛋白甲基转移酶(PRMT)蛋白表达、二甲基精氨酸二甲胺水解酶(DDAH)和活化蛋白(AP-1)活性.结果 AngⅡ呈浓度和时间依赖性增加PRMT的表达,AngⅡ(10-6 mol·L-1,24 h)显著增加培养液中ADMA、TNF-α水平,减少NO的生成,降低细胞DDAH活性,增加细胞AP-1活性.氯沙坦可拮抗AngⅡ所致的上述效应.结论 这些结果提示氯沙坦诱导的血管内皮细胞保护作用可能与降低ADMA水平有关.
