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新疆哈萨克族和汉族食管癌组织ECRG2基因遗传多态性与易感性的关系
目的:研究食管癌相关基因2(ECRG2)短串联重复序列(STR)多态性与新疆哈萨克族和汉族食管癌易感性的关系.方法:新疆地区食管癌哈萨克族94例,汉族84例;人群对照哈萨克族100例,汉族53例,采用聚合酶链反应单链构象多态性分析(PCR-SSCP)技术检测研究对象的ECRG2STR基因型.结果:ECRG2 STR呈多态性,可分为3种类型:TCA3/TCA3,TCA4/TCA4和TCA3/TCA4.3种基因型在有转移的食管癌中分布为58.8%,7.8%和33.3%,在无转移的食管癌中分布为14.2%,40.9%和44.9%,两者相比有显著差异(x2=40.74,v=2,P＜0.01),携带TCA3/TCA3基因型个体更容易发生转移.汉族人群中,携带TCA3/TCA3基因型个体患食管癌的风险比TCA4/TCA4基因型个体高3.25倍(95%的可信区间为1.25-8.45);在哈萨克族人群中,携带TCA3/TCA3基因型个体患食管癌的风险比TCA4/TCA4基因型个体高4.06倍(95%的可信区间为1.69-9.74).结论:携带ECRG2基因TCA3/TCA3基因型个体与TCA4/TCA4基因型个体比较,增加了患食管癌和发生转移的风险.
关键词： 食管癌相关基因2 基因多态性 食管癌 短片断重复序列 聚合酶链反应单链构象多态性 -
顺铂联合食管癌相关基因2蛋白对人食癌EC9706细胞的增殖抑制研究
目的 研究顺铂(DDP)联合食管癌相关基因2(ECRG2)蛋白对人食管癌EC9706细胞增殖抑制作用及诱导其凋亡的机制.方法 将人食管癌EC9706细胞分为空白对照组、阳性对照组和低、中、高3个质量浓度实验组.阳性对照组细胞用3 mg· L-1顺铂处理,低、中、高3个质量浓度实验组细胞在阳性对照组的基础上用质量浓度为5.5,7.5,9.5 μg· L-1的ECRG2蛋白处理,空白对照组细胞不做任何处理.检测各组细胞的活性和细胞凋亡率,用反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)法检测人食管癌EC9706细胞耐药基因的表达情况.结果 空白对照组、阳性对照组和低、中、高3个质量浓度实验组人食管癌EC9706细胞活性分别为100.00％,(92.12±2.36)％,(88.62±3.22)％,(82.15±2.05)％,(78.41±2.16)％,阳性对照组和3个质量浓度实验组细胞活性显著低于空白对照组(P ＜0.05或P＜0.01),中、高质量浓度实验组均显著低于阳性对照组(均P ＜0.05);且中、高质量浓度实验组细胞活性随ECRG2蛋白作用浓度增大逐渐降低(P＜0.01).阳性对照组和低、中、高3个质量浓度实验组人食管癌EC9706细胞凋亡率分别为(5.21±0.24)％,(11.45±0.66)％,(16.86±1.42)％,(22.62±2.12)％,均显著高于空白对照组的(2.89±0.32)％,低、中、高3个质量浓度实验组细胞凋亡率均明显高于阳性对照组(均P＜0.01).阳性对照组和低、中、高3个质量浓度实验组细胞谷胱甘肽巯基转移酶-πr(GST-π)和多药耐药蛋白基因(MRP)mRNA相对表达量均低于空白对照组,且低、中、高3个质量浓度实验组低于阳性对照组(P ＜0.05或P＜0.01).结论 顺铂可增强ECRG2蛋白对人食管癌EC9706细胞的增殖抑制作用,并可促进细胞凋亡,其机制可能与顺铂联合ECRG2显著降低GST-π和MRP基因表达有关.
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食管癌相关基因2原核表达质粒的构建与诱导表达
目的:构建食管癌相关基因2(ECRG2)原核表达质粒,在大肠杆菌(E.coli)中诱导表达重组蛋白.方法:用聚合酶链反应法扩增ECRG2基因开放阅读框(ORF),构建表达载体pGEX-4T-1-ECRG2,测序鉴定后转化E.coli(BL21)进行异丙基-β-D-硫代半乳糖苷诱导表达,目的蛋白进行SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(PAGE)、Western免疫印迹鉴定.结果:SDS-PAGE测定GST/ECRG2蛋白分子质量约34ku,Western blot验证出目的蛋白特异表达.结论:ECRG2 ORF插入pGEX-4T-1质粒并在E.coli中成功表达.
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ECRG2基因遗传多态性与新疆哈萨克族食管癌相关性研究
目的:探讨食管癌相关基因2( ECRG2)的多态性在新疆哈萨克族食管癌组织中的基因型分布特点及其在食管癌发生中的作用及意义.方法:应用PCR - SSCP技术检测94例哈萨克族食管癌和100例哈萨克族正常对照人群血样中ECRG2外显子4处短串联重复序列(STR)多态性基因型及其分布特点.结果:新疆哈萨克族食管癌组织及正常人群血样组织中ECRG2 STR呈多态性,可分为3种类型:T℃A3/TCA3,TCA4/TCA4,TCA3/TCA4,3种基因型在食管癌和对照组中构成比分别为22.3%、30.9%、46.8%和10%、56%、34%,经卡方检验,哈萨克族食管癌及正常对照组中3种基因型总构成比有显著差别(x2＝ 13.589,df＝2,P＜0.01)；3种基因型在哈萨克族有转移的食管癌组中分布分别为47.8%、8.7%、43.5%,在无转移的哈族食管癌组中分布为14.1%、38.0%、47.9%,两组差异有统计学意义(x2＝ 13.77,df＝2,P＜0.01)；在哈萨克族人群中,携带TCA3/TCA3基因型个体患食管癌的风险比TCA4/TCA4基因型个体高4.06倍(95%的可信区间为1.69 ～9.74).结论:ECRG2基因TCA3/TCA3基因型与TCA4/TCA4基因型比较,增加了哈萨克族患食管癌的风险.
关键词： 食管癌相关基因2 基因多态性 短片断重复序列(STR) 哈萨克族
