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  • 曲古菌素A对食管癌EC1细胞增殖和细胞周期的影响及其分子机制

    作者:马俊芬;江亚南;赵继敏;黄幼田;赵明耀;董子明

    目的:探讨不同浓度曲古菌素A对食管癌细胞系EC1 细胞增殖、细胞周期的影响及其对细胞周期调控基因p21 WAF1/CIP1 表达的影响. 方法:用0.3,0.5,1.0 μmol/L 的TSA 处理EC1 细胞,MTT 检测TSA 作用24 、48 h 对EC1 细胞的抑制作用,流式细胞仪检测0.3,0.5,1.0 μmol/L 的TSA 作用24 h 后EC1 细胞周期的改变,Western blot 法检测p21 WAF1/CIP1 变化. 结果:TSA 在0.5 μmol/L 以上时对EC1 细胞有抑制作用;0.3 μmol/L TSA 处理细胞后细胞周期与对照组相比,无明显变化;0.5 μmol/L TSA 处理EC1 细胞后,G0/G1期细胞较对照组明显增加,S 期细胞较对照组明显减少(74.56% ±1.34% vs 62.12%±0.52%;14.52%±1.81% vs 27.50%±0.66%,均P <0.05);0.5,1.0 μmol/L TSA 处理细胞后p21 WAF1/CIP1 表达明显增加(均P<0.05). 结论:一定浓度的TSA 对人食管癌细胞EC 具有的增殖抑制作用,引起EC1 细胞发生G0/G1 期阻滞,其部分机制与p21 WAF1/CIP1 上调有关.

  • 小RNA靶向激活p21WAF1/CIP1基因表达对BEL-7402肝癌细胞增殖和凋亡的影响

    作者:吴志明;黄欢;刘卓炜;郭琤琤;蒋丽娟;董培;贾国金;陈刚

    目的 探讨RNA激活技术上调p21WAF1/CIP1基因的表达而影响人肝癌细胞株BEL-7402的增殖和凋亡能力.方法 将与p21WAF1/CIP1基因启动子区域DNA序列互补的RNA分子(dsP21-322)转染入BEL-7402细胞中,采用qPCR法及Western印迹方法检测p21 WAF1/CIP1的表达;采用WST-1细胞增殖试剂检测细胞增殖情况;使用流式细胞仪评估肿瘤细胞凋亡情况并使用Western印迹方法检测相关分子表达水平的变化.结果 dsP21-322转染72 h后,BEL-7402细胞中p21 WAF1/CIP1表达显著上调;细胞增殖受到明显抑制,凋亡率36.86%(细胞的体积变小、变形,细胞核固缩,染色质凝聚呈深染,细胞出现皱缩、变圆、脱落)较对照组(11.51%、14.06%)相比明显升高.结论 RNA激活技术靶向上调p21WAF1/CIP11基因表达并抑制细胞增殖、增加诱导肿瘤细胞凋亡,可作为肝细胞癌或其他恶性肿瘤基因治疗的一种有效手段.

  • 曲普瑞林对人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B的作用及对P21 WAF1/CIP1基因表达的影响

    作者:翟红莉;张三元

    目的 研究曲普瑞林对子宫内膜癌细胞株HEC-1-B的抑制作用及其分子作用机制.方法 以不同浓度曲普瑞林(10-9~10-5mol/L)体外作用于子宫内膜癌细胞株HEC-1-B,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞抑制率,免疫组织化学检测细胞中P21WAF1/CIP1(简写为P21)蛋白表达,并用病理图像分析软件进行半定量分析.反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测P21mRNA的表达.结果 ①当曲普瑞林浓度为10-9mol/L时,癌细胞即受到抑制,抑制率为36.8%;随着曲普瑞林浓度的增大,抑制率渐高.到浓度为10-5mol/L时抑制率上升至57.4%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).②浓度从10-9mol/L~10-5mol/L的曲普瑞林作用72 h后,P21的表达有不同程度的上升,与对照组相比,差异有统计学意义(P<O.05).结论 ①曲普瑞林在体外对HEC-1-B细胞可能有直接的抑制作用,且呈剂量依赖关系.②曲普瑞林抑制HEC-1-B细胞增殖,其分子作用机制可能与上调P21蛋白表达有关.

  • 曲普瑞林对人子宫内膜癌细胞株HEC-1-B的作用及对P21 WAF1/CIP1基因表达的影响

    作者:翟红莉;张三元

    目的 研究曲普瑞林对子宫内膜癌细胞株HEC-1-B的抑制作用及其分子作用机制.方法 以不同浓度曲普瑞林(10-9~10-5mol/L)体外作用于子宫内膜癌细胞株HEC-1-B,用四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测细胞抑制率,免疫组织化学检测细胞中P21WAF1/CIP1(简写为P21)蛋白表达,并用病理图像分析软件进行半定量分析.反转录-聚合酶链反应(RT-PCR)法检测P21mRNA的表达.结果 ①当曲普瑞林浓度为10-9mol/L时,癌细胞即受到抑制,抑制率为36.8%;随着曲普瑞林浓度的增大,抑制率渐高.到浓度为10-5mol/L时抑制率上升至57.4%,与对照组比较差异有统计学意义(P<0.05).②浓度从10-9mol/L~10-5mol/L的曲普瑞林作用72 h后,P21的表达有不同程度的上升,与对照组相比,差异有统计学意义(P<O.05).结论 ①曲普瑞林在体外对HEC-1-B细胞可能有直接的抑制作用,且呈剂量依赖关系.②曲普瑞林抑制HEC-1-B细胞增殖,其分子作用机制可能与上调P21蛋白表达有关.

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