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丙型肝炎病毒相关适配分子的研究进展
指数富集配基的系统进化(systematic evolution of ligand by exponential enrichment,SELEX)技术是一类新的组合化学技术,应用人工合成的随机寡核苷酸文库,通过体外筛选、分离、富集获得能与靶物质特异性结合的寡核苷酸适配子.具有实用范围广、筛选过程简便、适配子有高特异性和高亲和性等特点.适配子的选择性在很多方面优于抗体,在分子识别研究中具有重要价值,可用于靶物质的测定、阻断靶物质的生物活性.本文综述SELEX技术及寡核苷酸适配子在丙型肝炎病毒诊断和治疗领域的新进展,并且对其前景进行分析和预测.
关键词： 适配子 丙型肝炎病毒 指数富集配基的系统进化技术 -
SELEX技术在胰腺癌分子诊断及靶向治疗中应用的研究进展
胰腺癌由于起病隐匿,早期诊断率较低,临床治疗效果差,是目前预后差的恶性肿瘤之一.目前,临床上尚缺乏有效的非创伤早期筛查胰腺癌的手段,因而胰腺癌的早期诊断和治疗显得尤为重要.近年来,指数富集配基的系统进化(SELEX)技术以其在其他疾病中所表现的应用价值为疾病的诊治提供了一个新的途径.对于缺乏有效确诊手段,发病隐匿且病死率高的胰腺癌而言,SELEX技术基于胰腺癌发病的分子机制,可以筛选出特异结合于胰腺癌分子靶标的适配体,对筛选所得适配体进一步化学修饰,可以实现分子水平成像及靶向治疗,进而达到胰腺癌早期诊治的目的,具有重要的临床意义.本文就SELEX技术在胰腺癌分子诊断及靶向治疗中的应用研究进展进行了综述.
关键词： 指数富集配基的系统进化技术 胰腺癌 分子诊断 靶向治疗 -
泡沫细胞靶向适配子的体外筛选
目的 筛选巨噬细胞源性泡沫细胞的寡核苷酸适配子,为动脉粥样硬化的靶向治疗提供实验依据.方法 以80 mg/L氧化型低密度脂蛋白孵育THP-1巨噬细胞72 h,建立泡沫细胞模型;利用指数富集配基的系统进化技术,从体外合成的随机单链DNA文库中筛选特异性寡核苷酸适配子;荧光显微镜观察寡核苷酸文库与泡沫细胞结合的特异性;克隆、测序确定适配子的序列并进行一级结构和二级结构分析.结果 通过油红O染色和高效液相色谱分析,确定成功建立泡沫细胞模型;经过18轮的循环筛选,寡核苷酸文库仅与泡沫细胞结合,不再结合巨噬细胞、血管平滑肌细胞.测序鉴定出的所有适配子序列可以分为12个家族,没有共同的同源序列.二级结构分析表明,适配子主要形成茎环结构,这可能是适配子与巨噬细胞源性泡沫细胞结合的结构基础.结论 利用复合靶指数富集配基的系统进化技术成功筛选出巨噬细胞源性泡沫细胞的寡核苷酸适配子.
