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  • 复合聚合酶链反应检测恶性疟原虫及混合感染

    作者:孙明林;薛采芳;樊荣;刘忠湘

    目的应用一种简易、快速的复合PCR扩增系统检测恶性疟原虫及混合感染.方法以间日疟原虫(P.v)和恶性疟原虫(P.f)小亚单位核糖体核糖核酸基因(SSUrDNA)特定片段为靶基因,设计并合成引物,建立复合PCR扩增系统.采用煮沸法快速制备DNA模板研究本系统的敏感性和特异性,并用于临床血样的检测.结果从P.v和P.f感染血样中分别扩增出分子量大小为705 bp和575 bp的特定扩增带.而食蟹猴疟原虫、诺氏疟原虫及正常人血样均无扩增带出现.单独检测P.f敏感度达到0.47×10-6(约2虫/μl全血),在P.v存在的情况下,检测P.f敏感度为0.47×10-5.检测104例疟区门诊患者冻存血标本,84例与镜检法结果相同,并发现24例混合感染和2例为镜检虫种鉴别失误.结论本系统敏感性高,特异性强,操作简单,并可在一次扩增中同时检出P.v和P.f,具有一定的推广应用价值.

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