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人免疫缺陷病毒-Ⅰ文献资料
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人免疫缺陷病毒Ⅰ型gag、env、rev mRNA检测
目的动态检测人免疫缺陷病毒Ⅰ型(HIV-1)基因gag、env、rev mRNA水平.方法将插入有HIV-1竞争模板的pSPI质粒DNA转化入感受态菌STBL-2,进行扩增.以T7 RNA聚合酶体外转录出HIV-1 mRNA竞争模板.用3对引物对HIV-1 RNA标本进行定量竞争聚合酶链反应(QC-RT-PCR), 检测HIV-1 gag、env、rev mRNA 水平.结果 HIV-1 ⅢB感染的标本中,HIV-1 gag、env和rev mRNA的水平分别为36 000拷贝/μl,9 800拷贝/μl和9 100拷贝/μl.此方法可动态定量检测HIV-1 gag、env、rev mRNA水平.结论该方法简便易行,费用低廉,适用于实验室HIV致病机理、药物筛选和病毒复制状况的研究.