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汉防己甲素、雷洛昔芬及其联合应用逆转人肝癌耐药细胞株多药耐药性的研究
目的:探讨汉防已甲素(TTD)、雷洛昔芬及其联合应用对人肝癌多药耐药细胞株Hep-3B/ADM耐药性的逆转作用.方法:通过阿霉素(ADM)浓度梯度递增诱导法,建立人肝癌多药耐药细胞株Hep-3B/ADM.MTT法检测细胞对化学疗法药物的敏感性;流式细胞仪检测P-gP的表达及细胞内ADM强度.结果:ADM对Hep-3B和Hep-3B/ADM细胞的IC50分别为0.059 μg/ml和2.131 μg/ml,雷洛昔芬(4.90 μmol/L)及TTD(1.00 μmol/L)单用和两药联合处理Hep-3B/ADM细胞时,ADM的IC50值分别为0.234μg/ml、0.168μg/ml、0.096μg/ml.TTD及雷洛昔芬可降低耐药细胞株P-gp蛋白的表达,且联用有增强效果,同时还观察到逆转剂雷洛昔芬和TTD作用后细胞内阿霉素浓度增加,两药联合作用时效果增强.结论:TTD及雷洛昔芬均可逆转耐药,且联合作用效果增强.
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汉防己甲素抑制恶性腹腔积液中原代肿瘤细胞作用的观察
目的:研究中药单体汉防己甲素对恶性腹腔积液中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用.方法:体外培养肿瘤细胞系BGC-823、LOVO和SMMC-7721,WST-8法检测汉防己甲素在细胞系中的抗肿瘤作用.收集21例经病理确诊的恶性腹腔积液并分离原代肿瘤细胞,用WST-8法检测原代肿瘤细胞中汉防己甲素及化疗药的药物敏感性,荧光定量RT-PCR法检测汉防己甲素对凋亡相关蛋白基因Survivin及Bcl-2 mRNA表达的作用.结果:汉防己甲素对21例恶性腹腔积液中原代肿瘤细胞IC50平均值为32.96μm,与三株细胞系中的IC50差异无统计学意义,P>0.05.汉防己甲素对胃癌、大肠癌及其他消化道肿瘤来源的腹水中原代肿瘤细胞的抗肿瘤作用差异无统计学意义,P>0.05.2例对汉防己甲素耐药的原代肿瘤细胞对多西紫杉醇、氟尿嘧啶和顺铂存在交叉耐药,而对化疗药物耐药的原代肿瘤细胞对汉防己甲素无交叉耐药.汉防己甲素对部分细胞系及原代细胞中凋亡相关蛋白Survivin及Bcl-2 mRNA有明显下调作用,P<0.05.结论:汉防己甲素对恶性腹腔积液原代肿瘤细胞,尤其对化疗药物耐药的肿瘤细胞有一定的抗肿瘤作用.
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粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用
目的:探讨粉防己碱对瘢痕成纤维细胞的生物学作用及其在瘢痕治疗中的意义.方法:采用瘢痕成纤维细胞培养和兔实验性瘢痕模型,观察粉防己碱对瘢痕成纤维细胞生物学特性的影响.结果:体外试验显示,粉防己碱各实验组3H-TdR掺入率和3H-脯氨酸掺入率均较对照组明显降低,呈剂量依赖关系.动物实验透射电镜表明,对照组瘢痕成纤维细胞中有丰富、高度发达的粗面内质网;粉防己碱治疗组瘢痕成纤维细胞内粗面内质网明显减少,提示其蛋白合成与分泌功能受抑.结论:粉防己碱对瘢痕成纤维细胞增殖、胶原合成与分泌功能具有抑制作用.
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汉防己甲素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖的影响
目的:探讨汉防己甲素对增生性瘢痕成纤维细胞增殖活力的影响及其在瘢痕治疗中的意义.方法:利用瘢痕成纤维细胞体外培养模型,采用MTT记数、流式细胞仪记数及氯胺T法,观察并分析了汉防己甲素对瘢痕成纤维细胞增殖活力以及细胞外胶原量的影响,并采用直线相关法分析两者的关系.结果:汉防己甲素剂量及时间依赖性地使细胞生长曲线压低,群体倍增时间延长,细胞外胶原蛋白量减少且两者呈直线正相关.结论:汉防己甲素对增生性瘢痕成纤维细胞具有抑制作用,且此正为其抗瘢痕作用机理之一.
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粉防己碱抑制激光诱导鼠脉络膜新生血管
目的观察玻璃体腔注射粉防己碱对实验性鼠脉络膜新生血管的抑制作用及其对视网膜结构和功能的影响.方法应用半导体激光(波长810 nm,曝光时间0.1 s,光斑直径100 μm,能量120mW)光凝诱导20只Brown Norway(BN)大鼠20只眼的脉络膜新生血管(CNV)模型.将大鼠随机分为实验组和对照组,每组各10只大鼠20只眼,实验组大鼠激光光凝后0、3 d玻璃体注射0.05 ml浓度为3.21μmol/L的粉防己碱药液,对照组玻璃体内注射同体积的生理盐水;两组均在激光光凝14 d后行荧光素眼底血管造影,观察其新生血管的发生率.另有5只健康BN大鼠,每只鼠右眼玻璃体内注射入0.05 ml浓度为3.21 μmol/L的粉防己碱药液,左眼注射同体积生理盐水,第一次注药前及注药后1 h、1 d和第二次注药后1 h、1、7、14 d行视网膜电图(ERG)检查,第二次注药后14 d行光学、电子显微镜检查.结果实验组大鼠CNV发生率为23.26%,明显低于对照组63.33%(P＜0.01).3.21 μmol/L的粉防己碱玻璃体内注射b波波幅比率与注药前相比差异无统计学意义(P＞0.05).光学、电子显微镜检查未见明显细胞异常.结论粉防己碱能抑制鼠CNV形成;3.21 μmol/L浓度的粉防己碱玻璃体内注射对视网膜无毒性作用.
