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屋尘螨重组蛋白文献资料
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重组Derp2变应原诱导小鼠变态反应气道炎症动物模型的建立
目的建立重组屋尘螨Derp2变应原(rDerp2)诱导的小鼠变态反应气道炎症动物模型. 方法在大肠杆菌中诱导表达Derp2重组蛋白,用镍亲和柱层析法提纯重组蛋白;32只BALB/c小鼠随机分为屋尘螨粗浸液组(A组)、屋尘螨粗浸液+rDerp2组(B组)、rDerp2组(C组)、对照组(D组).分别观察肺组织病理变化与支气管肺泡灌洗液(BLAF)中细胞学变化,采用酶联免疫吸附试验(ELISA)测定BLAF中和脾细胞培养上清IL-4与INF-γ变化,ELISA测定血清中IgE、IgG1与IgG2a 抗体变化. 结果成功表达、纯化Derp2重组蛋白;A、B、C组肺部病理改变呈现明显的变态反应性炎症;A、B、C组小鼠BALF中的细胞总数、淋巴细胞、中性粒细胞数和EOS计数显著高于D组(P＜0.01);A、B、C组BALF中IL-4含量分别为(109.35±16.46) pg/ml、(88.87±5.66) pg/ml、(85.59±6.05) pg/ml,与D组(23.17±2.67) pg/ml相比差异有统计学意义(P均＜0.01).A、B、C组抗原特异性IgE抗体分别为0.49±0.04、0.41±0.02、0.37±0.04,与D组(0.03±0.01)相比差异有统计学意义(P均＜0.01);A、B、C组小鼠脾细胞分泌IL-4分别为(266.20±19.18) pg/ml、(252.72±15.81) pg/ml、(243.62±19.07) pg/ml,与D组(15.99±1.56) pg/ml相比差异有统计学意义(P均＜0.01). 结论用rDerp2能成功建立小鼠变态反应气道炎症动物模型.
