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DC-SIGN启动子活化信号通路对HIV-1 5'LTR活性的影响
目的 研究诱导DC-SIGN启动子活化的信号通路对HIV-1 5'LTR活性的影响.方法 PCR法扩增DC-SIGN启动子及HIV-1 5'LTR序列,通过双酶切重组到荧光素酶报告质粒中,构建DCSIGN启动子和HIV-1 5'LTR荧光素酶报告质粒.以PMA分化的THP-1细胞作为细胞模型,分别转染DC-SIGN启动子和HIV-1 5 'LTR荧光素酶报告质粒,并以相应的信号通路阻断剂处理,以1000IU/ml的IL-4诱导24 h后检测荧光素酶活性.结果 HIV-1 5'LTR荧光素酶报告质粒的活性明显弱于DC-SIGN启动子,IL-4诱导可以使DC-SIGN启动子和HIV-1 5'LTR荧光素酶报告质粒的活性升高至2倍以上.ERK、JAK-STAT和NF-κB信号通路阻断剂均能够降低DC-SIGN启动子荧光素酶报告质粒的活性,其中ERK1/2抑制剂抑制活性强,几乎完全阻断了IL-4的诱导效应.对于HIV-1 5 'LTR荧光素酶报告质粒,NF-κB信号通路阻断剂阻断效果明显,阻断效率为52.32%,ERK信号通路阻断剂阻断效率为43.31%.结论 IL-4诱导的信号通路在活化DC-SIGN启动子的同时,对HIV-15 'LTR也具有一定的活化作用,并主要通过NF-κB和ERK信号通路实现.