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SNAP-23文献资料
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Syntaxin 4蛋白在NK细胞中的表达及与SNAP-23蛋白的相互作用
目的研究NK细胞中与囊泡分泌有关的膜蛋白syntaxin 4的表达和与其它蛋白的相互作用,为进一步研究NK细胞免疫效应的分泌调节分子机制提供新思路. 方法 RT-PCR和免疫印迹方法检测人类NK细胞syntaxin 4的表达,免疫荧光显微镜观察静息状态和经靶细胞激活后syntaxin 4蛋白在NK92细胞中表达和分布的变化,免疫共沉淀检测syntaxin 4蛋白和SNAP-23蛋白的相互作用. 结果人类NK细胞中在mRNA水平和蛋白质水平均有syntaxin 4组成性表达,蛋白产物主要分布在细胞膜上.异种靶细胞刺激后,syntaxin 4蛋白有明显的细胞内定位变化和极化现象.syntaxin 4蛋白和SNAP-23蛋白有较强的相互作用. 结论 syntaxin 4蛋白与NK细胞对靶细胞的识别过程有关,并与胞内膜交换相关分子SNAP-23蛋白相互作用,可作为研究干预移植排斥反应中杀伤性胞吐的新目标分子.
关键词： syntaxin 4 NK细胞 SNAP-23 杀伤性胞吐 移植 -
SNAP-23对NK细胞杀伤效应的调控
目的探讨SNAP-23对NK细胞杀伤效应的调控作用.方法通过核酸转染仪转染SNAP-23 shRNA(short hairpin RNA)质粒阻断NK92细胞中SNAP-23蛋白的表达,分别利用乳酸脱氢酶(LDH)释放实验和β-己糖氨酶释放实验检测SNAP-23表达下降对NK细胞杀伤效应和胞吐效应的影响.结果核转染仪可将shRNA质粒成功转入NK92细胞,所设计的3条SNAP-23的shRNA能抑制SNAP-23的蛋白表达,继而导致NK92细胞的杀伤活性和胞吐效应下降.结论SNAP-23通过调控NK细胞的胞吐效应而参与NK细胞杀伤效应的调控.
