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B7-H4介导小鼠间充质干细胞株C3 H10 T1/2对EAE小鼠T细胞亚群的作用
目的：探讨负性共刺激分子B7-H4在小鼠间充质干细胞株C3H10T1/2(以下简称C3H10)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠免疫调节的作用及其机制。方法体外试验：构建小鼠B7-H4靶向shRNA稳定转染的C3H10细胞(C3H10-B7-H4细胞)，将转染前后的细胞分别与植物血凝素( PHA)激发的小鼠脾脏淋巴细胞共培养，用ELISA法检测培养上清细胞因子的分泌。体内试验：制备小鼠EAE模型，将50只小鼠分为5组：正常对照组、EAE组、C3H10组(移植 C3H10细胞)、C3H10-NC组(移植shRNA对照质粒转染的C3H10细胞)、C3H10-B7-H4组(移植C3H10-B7-H4细胞)，并在免疫后第6天，各组细胞以1×106个/只小鼠尾静脉输注，每日对各组小鼠进行神经功能缺损评分；用ELISA法检测小鼠外周血IL-2、IL-17、IFN-γ、IL-4的表达变化。结果体外试验：B7-H4靶向shRNA转染C3H10可抑制B7-H4的表达；下调表达B7-H4的C3H10细胞对脾细胞分泌IL-2、IL-17、IFN-γ的抑制作用减弱，而对IL-4无明显影响；体内试验：下调表达B7-H4的C3H10细胞对EAE小鼠的治疗作用减弱，表现在神经功能缺损评分增高，发病时间及发病高峰时间均较C3H10组提前。下调表达B7-H4的C3H10细胞治疗EAE小鼠后对血浆中IL-2、IL-17、IFN-γ的表达抑制作用减弱，但对IL-4的表达无影响。结论负性协同刺激分子B7-H4介导了C3H10移植治疗EAE的免疫调节，这一过程可能是调节Th1、Th17等炎性效应性T细胞间接发挥作用。
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不同穴位针刺对免疫抑制大鼠T细胞极化及相关因子的影响
目的:观察不同穴位针刺后对免疫抑制模型大鼠T淋巴细胞亚群及外周血IFN-r、IL-4含量的影响,探讨不同穴位针刺后对免疫抑制大鼠T细胞极化及相关细胞因子的影响.方法:选取健康SD雄性大鼠45只.随机分5组,正常对照组(A组),模型对照组(B组),模型加针刺头针组(C组),模型加针刺体针组(D组),模型加针刺头针体针组(E组).采用环磷酰胺注射法制备免疫抑制模型,分别选取"头穴(百会及旁开4 mm两针丛刺)"、"体穴(足三里和关元)"、"头穴加体穴"进行针刺,时间为20 min,每隔5 min进行补法捻针.采用ELISA法测定血清IFN-r和IL-4含量;采用流式细胞仪法测定外周血CD4+TC和CD8+TC含量.结果:B组大鼠外周血CD4+TC含量显著下降,与A组比较有非常显著性差异(P<0.01);经针刺治疗后,针刺各组外周血CD4+TC显著升高,与B组比较有显著性差异(P<0.05);治疗前后各组CD8+TC含量无显著变化(P>0.05).治疗前B组IFN-r含量下降、IL-4含量升高,与正常A组比较有显著性差异(P<0.05),治疗后各组IFN-r含量显著升高,与B组比较均有显著性差异(P<0.05),各组间以E组疗效佳,效果优于其它治疗组.结论:头针加体针的配穴方式可显著提高免疫抑制大鼠血中CD4+T淋巴细胞的含量,促使TH细胞向Th1型转化,增强机体细胞免疫的功能,疗效优于体针和头针组.
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骨髓T细胞高表达TNF-α在再生障碍性贫血免疫病理中的作用
目的观察再生障碍性贫血(AA)患者骨髓中肿瘤坏死因子(TNF-α)含量变化、分泌的细胞及临床意义.方法应用Elisa检测骨髓TNF-α水平,多色免疫荧光标记技术和流式细胞术分析T细胞膜型、胞浆内TNF-α含量;纯化T细胞经植物凝血素(PHA)、Flt3配体(FL)及白介素-2(IL-2)激发后培养上清中TNF-α水平;T辅助细胞(Th)亚群改变.结果AA患者骨髓中TNF-α水平显著升高与对照组比P＜0.05,且与患者外周血白细胞数呈负相关(r=-0.78,P＜0.05).患者骨髓T细胞无膜型TNF-α及受体表达,CD4+和CD8+细胞胞浆中TNF-α含量显著增加,但两者无差别;淋巴细胞经PHA、FL及IL-2激发后培养上清中TNF-α水平升高,尤以PHA的作用为显著;AA患者骨髓中T细胞极化异常,Th1细胞比例增多,Th1/Th2增高.结论AA患者淋巴细胞极化异常,Th1细胞比例增多,骨髓中T细胞胞浆中TNF-α含量显著增多是AA骨髓衰竭的原因之一.
