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注射用布氏菌活疫苗免疫学评价
目的以小鼠为动物模型，通过检测布氏菌活疫苗免疫小鼠产生的体液免疫、细胞免疫应答及保护力，对其进行免疫学评价。
方法将30只小鼠随机分为3组，皮下免疫布氏活疫苗，免疫4周后分离血清及脾脏淋巴细胞。ELISA法检测免疫动物血清中总 IgG 抗体，抗体亚类 IgG1及 IgG2a；ELISPOT 法检测分泌 IFN-γ、IL-4的脾脏淋巴细胞数目，以及用 ELISA 方法检测体外再刺激后小鼠脾细胞分泌IFN-γ、IL-4的细胞因子水平；用羊布氏菌弱毒株 M5攻击免疫动物，通过脾脏细菌计数评价布氏活疫苗的免疫保护作用。
结果用 ELISA 法检测到免疫布氏活苗的小鼠体内有特异性抗体产生；ELISPOT 可检测到较高的分泌 IFN-γ脾脏淋巴细胞数目，ELISA 方法可检测到较高的 IFN-γ水平，表明布氏活疫苗主要诱导 Th1型免疫应答；通过布氏活疫苗保护力分析，表明该疫苗具有较好的免疫保护效果。
结论布氏疫苗采用注射免疫途径是可行的，免疫后能获得较好的免疫效果。 -
人用布氏菌疫苗浓度测定分光光度法的建立
目的 研究人用布氏菌疫苗浓度与吸光度(A)值之间的相关性,建立用分光光度法测定待侧疫苗吸光度值,经参考曲线得出其浓度的方法.方法 确定分光光度法测定布氏疫苗浓度的特异性、测定波长及线性范围.4个专业实验室经对7批成品疫苗进行比浊,测定与细菌浊度标准管(相当于布氏菌浓度25亿·ml-1)浊度一致菌液的吸光度值及标准管对应浓度±2000(即30亿·mL-1和20亿·mL-1)菌液的吸光度值,根据该结果制备布氏菌疫苗浓度测定用参考品.4个实验室应用该参考品分别对布氏菌疫苗进行协作测定,确定分光光度法测定布氏菌疫苗浓度的可行性.结果 确定600 nm作为吸光度测定波长,布氏菌疫苗浓度在10~50亿·ML-1之间时吸光度值与菌液浓度之间有很好的相关性(r=0.999,自由度=3,P<0.01).成功制备了3种浓度(即20、25、30亿·ML-1)的布氏菌疫苗浓度测定用参考品,其吸光度值分别为0.384,0.484和0.575.经4个实验室应用该参考品对布氏菌疫苗进行协作测定,测定误差小于5%.结论 分光光度法具有良好的重现性,适用于布氏菌疫苗的浓度测定.
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布氏菌苗皮内与划痕接种的效果评价
目的：将布氏疫苗通过皮内注射和皮上划痕方式免疫豚鼠，比较两种方式的免疫效果，为进一步研究人用皮内注射布氏菌活疫苗奠定基础。方法采用两种免疫方法免疫动物，免疫一个月后进行采血，用ELISA法检测血清中总IgG抗体；通过皮肤迟发性超敏反应进行体内细胞免疫评价；用羊布鲁氏菌弱毒株M5攻击免疫动物，通过脾脏细菌计数评价并比较两种免疫方法的保护效果。结果抗体检测结果显示，两种免疫方法均能诱导较强的体液免疫应答；皮内注射和皮上划痕对Br‐PPD抗原DT H阳转率均为100％；两种免疫方法的保护效果差异无统计学意义。结论通过体液免疫检测、细胞免疫评价和疫苗免疫保护力3个方面结果显示，皮内注射和划痕接种两种途径免疫效果相当。
