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非P53依赖性通路文献资料
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Nucleostemin表达下调对p53缺失型HL-60细胞自噬活性的影响
目的:结合前期基因芯片和生物信息学分析结果,探讨下调Nucleostemin (NS)表达对p53缺失型白血病HL-60细胞自噬活性的影响,为更深入研究NS非p53依赖性信号通路的关键节点提供依据.方法:在NS-RNAi-GV248重组慢病毒载体下调NS表达的基础上,采用吖啶橙染色、Western blot和透射电镜技术,检测HL-60细胞自噬活性的变化.结果:重组慢病毒载体成功抑制了HL60细胞中NS蛋白的表达;与空白对照组(3.1±0.28)％和阴性对照组(6.2±0.64)％相比,实验组HL-60细胞内酸性小体数量(22.4±0.76)％明显增高(P＜0.05);与阴性对照组(1.010±0.039)和空白对照组(0.608±0.008)相比,实验组HL-60细胞LC3Ⅱ/LC3 Ⅰ的比值(1.537±0.072)明显增高(P＜0.05);与阴性对照组(4.2±1.2)和空白对照组(2.3±0.5)相比,实验组中HL60细胞内自噬性结构的数量(8.7±3.1)明显增高(P＜0.05).结论:下调NS蛋白的表达可以增强p53缺失型HL-60细胞的自噬活性.
关键词： nucleostemin HL-60细胞 非P53依赖性通路 自噬活性
