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壳聚糖纳米纤维电纺膜体外对肝细胞作用的研究
生物人工肝作为肝功能衰竭的一种有效支持手段,近年来得到很大的进展,但如何长期维持其中肝细胞的活性及功能一直是困扰人们的难题.纳米生物材料的应用为这一问题的解决提供了可能的方案.用静电纺丝的方法将壳聚糖制备成纳米纤维电纺膜,同时采用经典的两步原位胶原酶灌注法分离大鼠肝细胞,观察肝细胞在纳米纤维电纺膜表面的形态,同时检测其活性和功能.肝细胞在壳聚糖纳米纤维电纺膜表面展示了良好的活性,并能与支架材料紧密结合.其尿素合成、蛋白分泌及细胞色素P450的活性均为对照组的1.5～2倍,糖原合成也较对照组有明显增强.壳聚糖纳米纤维电纺膜能促进肝细胞黏附,同时具有良好的生物相容性,从而促进肝细胞的功能,是生物反应器中肝细胞黏附介质的理想材料.
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EIF-GT/PCL纳米纤维电纺膜体外诱导hADSCs向表皮细胞表型转化的相关研究
目的 探讨表皮诱导因子复合体(Epidermal inducing factors,EIF)-明胶(Gelatin,GT)/聚己内酯(Polycaprolac-tone,PCL)纳米纤维电纺膜,体外诱导人脂肪干细胞(Human adipose derived stem cells,hADSCs)向表皮细胞表型转化的可行性,以及相关的生物学特性.方法 采用混合静电纺丝法制备EIF-GT/PCL纳米纤维电纺膜(实验组)和GT/PCL纳米纤维电纺膜(对照组),进行形态学观察和力学测试;通过酶联免疫吸附测定法绘制EIF-GT/PCL纳米纤维电纺膜的药物释放曲线;将hADSCs接种于两种电纺膜上进行体外培养,扫描电镜观察细胞-纳米纤维电纺膜黏附情况,CCK-8法检测细胞增殖情况,免疫荧光法检测CK10及CD105的表达情况.结果 实验组和对照组具有相似的纳米级结构,形态、密度均匀,力学特性佳;实验组能够平稳释放EIF达15 d以上;hADSCs在实验组上黏附更好,增殖更快.培养7 d后,实验组上hADSCs表达CK10,间充质干细胞标志物CD105表达减弱.结论 EIF-GT/PCL纳米纤维电纺膜具有良好的生物学特性,可诱导hADSCs向表皮细胞表型转化.
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明胶/姜黄素纳米纤维电纺膜皮下环境构建组织工程软骨的可行性研究
目的 探讨以明胶/姜黄素电纺材料为支架,在动物皮下构建组织工程化软骨的可行性.方法 取兔耳软骨获取软骨细胞作为种子细胞,体外培养扩增,并以明胶电纺膜(对照组)和明胶/姜黄素电纺膜(实验组)为支架构建软骨.将支架材料植入BALB/c裸鼠背部皮下后行大体观察;对支架材料及细胞-支架复合物行电镜观察;对细胞-支架复合物进行细胞增殖率检测;另将体外培养1周的细胞-支架复合物植入BALB/c裸鼠背部皮下,3周、12周后行组织学检测,比较不同时间点的软骨形成情况.结果 大体观察显示,相比对照组,实验组材料周围组织血管化受到明显抑制;SEM结果显示,两组材料中细胞均黏附良好;细胞增殖率检测结果显示,姜黄素对细胞增殖无显著影响;组织学观察显示,3周、12周时,两组细胞-支架复合物均有软骨陷窝形成;但相比对照组,实验组材料可见明显吸收,软骨基质形成较厚,均质性更佳.结论 明胶/姜黄素材料可作为支架在裸鼠皮下构建组织工程化软骨,具有潜在的应用前景.
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运用GT/PCL纳米纤维电纺膜在猪皮下构建组织工程化软骨的实验研究
目的 探讨运用GT/PCL电纺材料为支架,在大动物皮下构建组织工程化软骨的可行性.方法 成年大白猪耳廓软骨获取种子细胞,分别以GT/PCL电纺材料(实验组)和传统PGA/PCL(对照组)支架材料构建软骨.细胞-材料复合物在体外培养3周后,回植入自体猪皮下.分别于回植前、体内培养3周时行组织学检测、湿重和力学强度检测,比较两组的软骨形成情况.结果 体外培养3周后,两组均可见软骨组织形成,均可见明显未降解材料,对照组软骨基质分泌更为旺盛;体内培养3周后,实验组形成成熟的软骨组织,对照组未见明显软骨形成,基本为纤维组织所替代;实验组力学强度明显大于对照组.结论 GT/PCL电纺材料可以作为支架,在大动物皮下成功构建组织工程化软骨组织,是一种具有临床应用前景的支架材料.
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明胶/聚己内酯纳米纤维电纺膜在表皮组织工程中的应用
目的：观察明胶/聚己内酯（GT/PCL）纳米纤维电纺膜应用于表皮组织工程的可行性。方法测定HaCaT细胞（人类表皮细胞系）与电纺膜的生物相容性，并对于接种细胞前后该膜片的机械性能进行评价。应用CCK-8法检测细胞增殖情况。体内研究检测GT/PCL纳米纤维电纺膜构建的组织工程化表皮修复裸鼠皮肤缺损的效果。结果 HaCaT细胞能够在膜片上很好地附着和增殖，该膜片具有良好的生物相容性。机械性能测试显示，该膜片具有足够的力学特性以用于移植。体内研究表明，应用GT/PCL纳米纤维电纺膜构建的组织工程化表皮能够修复裸鼠的皮肤缺损。结论GT/PCL纳米纤维电纺膜是一种适合构建组织工程化表皮的支架材料。
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明胶/聚己内酯纳米纤维电纺膜在组织工程中的应用进展
天然高分子材料明胶(Gelatin,GT)和人工合成高分子材料聚己内酯(Polycaprolactone,PCL),两者都具有良好的生物相容性和可降解性,已被应用于组织工程研究领域.然而,单一组分的GT和PCL材料存在诸多缺点.GT/PCL复合材料克服了单一组分支架存在的缺点,具有理化性能佳和组分优势互补等特点,可应用于构建组织工程器官和修复组织损伤.本文对GT/PCL纳米纤维电纺膜的特征及其在组织工程多个领域中的应用研究现状进行系统性回顾.
