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基于PGMY09/11引物的PCR法检测高危型HPV的效果观察
目的 评估基于PGMY09/11引物的PCR法检测高危型人乳头瘤病毒(HPV)效果. 方法 采用HC Ⅱ试剂盒和基于PGMY09/11引物的PCR技术检测感染HPV16的50份样品和感染HPV18的50份样品,样品模板DNA分别按照1∶1、1∶2、1∶4、1∶8和1∶16倍比稀释,比较2种方法检测的敏感性和一致性.同时采用HC Ⅱ试剂盒和基于PGMY09/11引物的PCR技术检测感染单纯疱疹病毒(HSV)和沙眼衣原体(CT)的20份样品及单一感染HPV16和HPV18的10份样品,评估基于PGMY09/11引物的PCR检测HPV的特异性. 结果 HC Ⅱ试剂盒和基于PG-MY09/11引物的PCR对1∶1、1∶2稀释的HPV16和HPV18的检出率均为100％;HC Ⅱ对1∶4稀释的HPV16和HPV18的检出率为36％和46％,但不能检出1∶8和1∶16稀释的HPV16和HPV18样品;基于PGMY09/11引物的PCR对1∶4、1∶8和1∶16稀释的HPV16检出率分别为100％、90％和32％,对1∶4、1∶8和1∶16稀释的HPV18样品检出率分别为100％、86％和40％.HC Ⅱ试剂盒和基于PGMY09/11引物的PCR对HPV16检测的整体一致性为84.1％(Kappa值为0.674),对HPV18检测的整体一致性为81.7％(Kappa值为0.598).基于PGMY09/11为引物的PCR方法不能检测HSV和CT合并感染. 结论 基于PGMY09/11为引物的PCR方法检测出高危型HPV具有较高的敏感性和特异性,与市售HC Ⅱ试剂盒检测结果具有较高一致性,可用于HPV感染诊断.
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人乳头状瘤病毒检测与其在宫颈癌诊治中的应用
人乳头状瘤病毒(human papillomavirus,HPV)持续感染是宫颈癌发生发展的促进因素,其致瘤作用主要与其基因表达与蛋白转化有关.目前临床上用于检测HPV的方法主要有免疫组化、原位杂交、核酸印迹、聚合酶链反应(PCR)、第2代杂交捕获法(the second generation of hybrid capture,HC Ⅱ)等,其中HC Ⅱ是第1个经美国食品和药品管理局(US Food and Drug Administration,FDA)批准的临床检测高危型HPV方法.高危型HPV检测联合细胞学筛查可大程度优化防癌筛查的流程和宫颈异常细胞的临床处理,同时HPV检测也是宫颈癌治疗后随诊的重要方法.因此HPV检测在宫颈癌筛查、诊断及治疗随访中均具有十分重要的意义.
