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抗原定量检测文献资料
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双抗体夹心ELISA定量检测狂犬病病毒糖蛋白方法的建立及初步应用
目的 定量检测狂犬病病毒病毒样颗粒糖蛋白含量. 方法 以狂犬病病毒糖蛋白单克隆抗体作为捕获抗体,狂犬病病毒多克隆抗体作为检测抗体,标准品为以细胞半数感染量(TCID50)准确定量的狂犬病病毒SRV9毒株病毒液,建立检测狂犬病病毒糖蛋白(RABV-GP)含量的双抗体夹心ELISA检测方法,对各反应条件进行优化并分析其特异性、重复性和灵敏度. 结果 双抗体夹心ELISA定量检测方法佳工作条件为:狂犬病病毒糖蛋白蛋白单克隆抗体包被浓度为2.5 μg/ml,4℃包被过夜;1％ BSA,37℃封闭2h;狂犬病病毒多克隆抗体1∶200稀释,37℃孵育1.5h;酶标二抗1∶5 000稀释,37℃孵育1 h;TMB室温避光显色30 min. 结论 该方法可特异性定量检测狂犬病病毒,与犬细小病毒、犬瘟热病毒和犬传染性肝炎病毒均不发生反应.该方法线性检测范围为1×104～1.0×107 TCID50/ml,平均批内变异系数小于6％,平均批间变异系数小于8％.
关键词： 狂犬病病毒 双抗体夹心ELISA 糖蛋白 抗原定量检测
