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  • 3种转染试剂介导siRNA转染蚊细胞的比较研究

    作者:孙林春;孙海波;沈波;张利;于婧;朱昌亮

    目的 比较3种不同转染试剂介导siRNA转染蚊细胞的优缺点,选择优方法 用于转染后细胞存活率检测试验.方法 分别用FuGENE HD,X-tremeGENE和siPORT Amine 3种转染试剂介导特定siRNA转染蚊细胞,转染48 h后采用实时荧光定量PCR检测目的 基因的表达.比较3种方法 的干涉效率,转染试剂对细胞的毒性和不同方法 的操作步骤对实验结果 的影响.结果 FuGENE HD、X-tremeGENE和siPORT Amine转染后的干涉效率分别为70%、85%和29%;FuGENE HD和siPORT Amine对蚊C6/36抗性细胞毒性较小,X-tremeGENE对蚊细胞毒性较大;FuGENE HD的转染过程需要更换一次细胞培养液,X-tremeGENE的转染过程需要更换2次细胞培养液,siPORT A-mine的转染过程不需要更换培养液.结论 转染试剂的转染效果对于实验结果 有显著影响.在蚊细胞转染siRNA的实验中,FuGENE HD转染效率尚可,对细胞毒性小,转染过程只需1次换液操作;X-tremeGENE转染效率较高,对蚊细胞毒性较大,有2次换液操作;siPORT Amine毒性小且不需换液操作,但转染效率较低.综合评价:FuGENE HD更适用于转染siRNA后细胞存活率实验.

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