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阻断共刺激分子B7-1和B7-2对感染蠕虫小鼠免疫应答的影响
目的探讨共刺激分子B7-1和B7-2在蠕虫感染免疫中的作用. 方法用BALB/c小鼠皮下注射感染巴西日圆线虫第3期幼虫,在感染当天、感染后第3 d及第7 d分别腹腔注射大鼠抗B7-1和/或B7-2单抗,以阻断共刺激信号.于感染当天,感染后第7 d和第14 d,计数小鼠外周血液的嗜酸性粒细胞,于感染后第14 d计数小肠绒毛嗜酸性粒细胞;ELISA采用Watanabe N方法测定IgE抗体. 结果联合应用两种抗体抑制了外周血液及小肠组织的嗜酸性粒细胞增多;抑制了IgE抗体的产生.然而,单用抗B7-1或抗B7-2一种单克隆抗体,对嗜酸性粒细胞计数和IgE水平无明显影响. 结论在巴西日圆线虫感染免疫中,T细胞的激活需要B7-1和B7-2共刺激分子的参与;而B7-1或B7-2单一分子即可提供足够的共刺激信号.
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巴西日圆线虫诱导小鼠T辅助细胞的变化对伯氏疟原虫感染的影响
[目的]观察预感染巴西日圆线虫后,小鼠抵御伯氏疟原虫攻击感染的能力,并着重探讨T辅助细胞亚型在感染过程中的变化以及这些变化对宿主免疫力和预后的影响.[方法]皮下注射巴西日圆线虫感染C57BL/6小鼠,建立线虫预感染模型,于3 wk后腹腔注射伯氏疟原虫ANKA株攻击感染小鼠.观察每天原虫血症变化情况,并于疟原虫感染后0、3和9 d取脾,提取RNA,用RT-PCR扩增法定性观察细胞因子IFN-γ和IL-4的变化.[结果]与对照组相比,实验组感染疟原虫后,原虫血症的峰值出现时间明显延长,小鼠对疟原虫感染的耐受程度以及小鼠生存时间显著提高.实验组Th2型细胞合成IL-4的量在疟原虫感染0 d时明显高于对照组;而在3与9 d时两组均异常升高.Th1型细胞合成IFN-γ均量在疟原虫感染后3 d时实验组高于对照组,但在9 d时实验组IFN-γ有所下降.[结论]预感染巴西日圆线虫的小鼠具有较高的抗感染能力.但在攻击感染疟原虫后Th2型细胞被提前激活而抑制了Th1型细胞的正常功能,终仍导致小鼠死亡.
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测定小鼠细胞因子的双抗体夹心ELISA法的建立及应用研究
目的建立敏感的测定小鼠IL-5、IL-4和IFN-γ水平的生物素-链霉亲和素双抗体夹心ELISA法,并探讨该法在IL-5转基因小鼠感染模型中的应用价值.方法含大鼠抗小鼠IL-4、IL-5和IFN-γ单克隆抗体的杂交瘤细胞培养上清,经PM10膜超滤、50%饱和硫酸铵沉淀及Protein G-Sepharose亲和层析纯化.应用活化生物素制剂对纯化的TRFK4、BVD6和AN18单克隆体抗体进行生物素化.用纯化的2μg/ml TRFK5、8μg/ml 11B11和4μg/ml R4-6A2分别作为测定小鼠IL-5、IL-4和IFN-γ的包被抗体,然后逐步加入样品、生物素化TRFK4(1μg/ml)、BVD6(2μg/ml)和AN18(1μg/ml)、SA-HRPO和OPD,硫酸终止反应后读取A490值.结果所建立的生物素-链霉亲和素双抗体夹心ELISA法特异性和敏感性高,用于检测感染巴西日圆线虫感染的IL-5转基因小鼠和非转基因小鼠的血清标本取得了较好的效果.结论该ELISA方法对于测定小鼠细胞因子具有应用价值.
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伊维菌素抗巴西日圆线虫感染及对犬钩虫卵和杆状蚴的药效研究
目的为提供国产伊维菌素临床应用的科学依据，本文就其抗巴西日圆线虫感染及对犬钩虫卵和杆状蚴的作用进行了体内及体外的实验研究。方法取巴西日圆线虫卵用滤纸培养法进行体外培养，收集感染性幼虫经皮接种Wistai大鼠；采用水洗沉淀法收集钩虫卵，通过试管滤纸法培养杆状蚴。结果伊维菌素投与量在0.1mg/kg～0.3mg/kg，对中度感染巴西日圆线虫的大鼠具有明显的驱虫效果，0.1mg/kg时的驱虫率为92.07±5.66％，0.3mg/kg时的驱虫率为100％。而左旋咪唑投与量在15mg/kg时，才能取得与伊维菌素相同的驱虫效果。伊维菌素在0.005mg/ml～0.1mg/ml的范围内均有杀灭钩虫卵的作用，而相同剂量的左旋咪唑未见有此作用。然而伊维菌素在0.001mg/ml～0.3mg/ml剂量范围内对犬钩虫杆状蚴虽有一定的杀灭作用，但其效果低于相同浓度的左旋咪唑。结论进一步揭示伊维菌素对某些寄生虫具有高效的杀灭作用。
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国产伊维菌素(Ivermectin)驱除犬钩虫、巴西日圆线虫、鼠蛲虫的效果
目的观察国产伊维菌素对犬钩虫、巴西日圆线虫、鼠蛲虫的驱虫效果.方法采用犬钩虫-狗、巴西日圆线虫-大鼠及鼠蛲虫-大鼠动物模型进行研究.结果单次口服0.025mg/kg伊维菌素对犬钩虫的虫卵减少率、驱虫率和治愈率高达100%,服药后48h内排出97%虫体;单次灌胃0.62mg/kg对巴西日圆线虫的驱虫率达99.1%,完全治愈剂量为1.11mg/kg;单次灌胃2.0mg/kg对鼠蛲虫的驱虫率和治愈率均达100%.结论国产伊维菌素具有剂量小、疗效高、作用快、副反应轻等特点,是一种有前途的驱线虫药.
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共刺激分子CD80和CD86在蠕虫保护性免疫及其Th2免疫应答中作用机制的研究
目的:探讨共刺激分子CD80和CD86在蠕虫保护性免疫及其Th2免疫应答中的作用机制.方法:采用巴西日圆线虫第3期幼虫感染BALB/c小鼠,在感染当天、感染后第3、7d分别腹腔注射大鼠抗CD80和/或抗CD86单克隆抗体,以阻断协同刺激信号.在感染当天,感染后第7、14d,计数小鼠外周血液的嗜酸性粒细胞,于感染后第14d计数小肠绒毛嗜酸性粒细胞;采用Watanabe N法测定IgE.结果:联合应用抗CD80和抗CD86两种单克隆抗体可导致成虫产卵量明显增加,成虫数量显著增多及排虫时间延迟.同时两种单克隆抗体也完全抑制了外周血液及小肠组织的嗜酸性粒细胞的增多并部分抑制了IgE水平的升高.而单独应用抗CD80或抗CD86McAb对保护性免疫及Th2型免疫应答反应均无明显影响.结论:在蠕虫保护性免疫和Th2型免疫应答反应中,T细胞的活化需要CD80和CD86两种共刺激分子的参与;而CD80或CD86单一刺激分子即可提供足够的共刺激信号.研究提示,人为调控CD80和CD86共刺激分子可能有助于对蠕虫病及Th2型免疫应答所介导的其它疾病的治疗.
