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生物素探针在疟疾基因监测中的应用研究
本文报道了用光敏生物素标记恶性疟原虫特异克隆pBF2 DNA片断作探针,以斑点杂交试验检测不同疟区疟疾病人血样和蚊体内的疟原虫.探针检测蚊媒时,在20只蚊虫中有1只感染蚊虫即可被检出,也可将单个蚊虫直接压在硝酸纤维素膜上进行检测;探针检测血样亦取得良好结果,与镜检的符合率,恶性疟96.6%,正常人对照99.7%,检测的敏感度为90个原虫/μl血.表明该探针在疟防后期的监测中具有较好的实用性.
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生物素DNA探针/PCR系统用于班氏丝虫蚊媒监测的研究
目的:评价班氏丝虫特异生物素DNA探针/PCR系统用于丝虫病防治后期蚊媒监测的效果.方法:应用长臂光敏生物素标记的班氏丝虫种特异的DNA片段(490bp)为探针,结合聚合酶链反应技术,对实验室感染蚊虫和现场捕获蚊虫进行检测.结果:该探针只与班氏丝虫感染蚊提取的DNA杂交,不与马来丝虫感染蚊提取的DNA、其他动物丝虫DNA以及正常蚊DNA杂交.同批人工感染班氏微丝蚴蚊虫,人工解剖镜检阳性率为21.28%,探针检测阳性率为30.67%,差异无显著性(P>0.05).在平均感染度为1.6条幼虫/蚊情况下,50只蚊虫中有1只感染蚊即可被探针检出.在河南省班氏丝虫病流行区自病家和病村其他户分别捕获蚊虫,应用探针每20只为一组进行检测,蚊虫低阳性率分别为0.75%和0.19%,检测非病村正常蚊均为阴性.结论:该DNA探针/PCR系统的敏感性和特异性均达到实用水平,为丝虫病防治后期的监测增添了一新的有用工具.