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苛求芽孢杆菌胞内尿酸酶文献资料
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产朊假丝酵母尿酸酶与苛求芽孢杆菌尿酸酶特性的比较
目的 探讨产朊假丝酵母尿酸酶与苛求芽孢杆菌胞内尿酸酶的特性.方法 复苏、培养新购进菌株以制备尿酸酶,利用硫酸铵分级沉淀法、DEAE纤维素52层析和制备PAGE纯化尿酸酶,测定纯化的尿酸酶的活力、表征,并分析其亚基构成.结果 两种尿酸酶分子均为同四聚体,产朊假丝酵母尿酸酶的单肽链分子量和天然酶分子量分别为33.0 ku和134.0 ku,其适pH值接近8.8,在pH 7.4时可保留50%以上活性,该酶的米氏常数(K_m)为(32.8±3.1)μmol/L(n=10),黄嘌呤的抑制常数为(4.8±0.2)μmol/L(n=3);而苛求芽孢杆菌胞内尿酸酶则分别为35.7 ku和151.0 ku,适pH大于9.0,pH 7.4时酶活性保留不到30%,其K_m为(204±14)μmol/L(n=8),黄嘌呤的抑制常数为(41±7)μmol/L(n=5).结论 该研究对构建杂合药用尿酸酶以治疗高尿酸血症相关疾病具有一定的理论意义.
关键词： 产朊假丝酵母尿酸酶 苛求芽孢杆菌胞内尿酸酶 高尿酸血症
