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CT120反义寡核苷酸抑制肺腺癌细胞A549的生长
目的 探讨CT120基因与肺腺癌细胞A549生长、分化的关系.方法 构建含有CT120基因的反义表达载体(命名为pcDNA3.1-CT120),并将该载体转染肺腺癌细胞A549,应用G418筛选,获得了稳定表达CT120反义基因的克隆(命名为pcDNA3.1-CT120-A549).RT-PCR和Western blot检测CT120表达.流式细胞仪和软琼脂集落形成实验分析细胞生长,同时用RT-PCR检测P53、CyclinD1和CDK4的表达.结果 成功构建了含有CT120基因的反义表达载体,而且该载体能够有效抑制CT120在肺腺癌细胞A549中的表达.抑制CT120基因的表达能够抑制细胞的生长,促进细胞凋亡.在稳定表达CT120反义基因的克隆中P53表达明显上调,CydinD1和CDK4表达明显下调.结论 反义寡核苷酸抑制CT120的表达有可能是肺癌基因治疗的一个新的靶点.
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基因CT120在胶质瘤中的表达及意义
目的:研究基因CT120在胶质瘤组织中的表达及其与胶质瘤组织病理学的关系.方法:应用免疫组织化学方法检测50例胶质瘤手术切除标本、3例正常脑组织中CT120蛋白的表达;应用半定量RT-PCR检测20例胶质瘤、3例正常脑组织中CT120 mRNA的表达.结果:免疫组织化学检测发现正常脑组织中CT120蛋白无表达,50例胶质瘤组织中CT120蛋白表达阳性率为50.9%,不同级别胶质瘤中的表达无显著差异(χ2=2.99,P＞0.05);半定量RT-PCR检测正常脑组织中CT120 mRNA呈弱表达,不同病理级别胶质瘤CT120 mRNA表达无显著差异(χ2=3.25,P＞0 05).结论:基因120在胶质瘤有表达,但在胶质瘤发生发展中作用不明显.
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新基因CT120在肺癌组织中的表达及其对细胞生长的影响
背景与目的:基因CT120是我们实验室从染色体17p13.3位点获得的一个细胞膜相关新基因,mRNA水平检测结果表明该基因在人正常肺组织中不表达,但在人肺癌细胞系SPC-A-1中高表达.本研究进一步从蛋白水平研究CT120在肺癌及癌旁组织中的差异表达及CT120异位表达(ectopicex pression)与过表达(over expression)对细胞生长的影响.方法:用生物信息学方法设计15肽,合成并偶联到大分子载体KLH上制成人工免疫原,制备鸡抗CT120多肽抗体;通过Wester nblotting方法检测CT120在不同肿瘤细胞系中的表达;通过免疫组织化学技术比较CT120在肺癌及癌旁组织中的差异表达;通过集落形成试验研究CT120异位表达对NIH/3T3细胞生长的影响;通过生长曲线及裸鼠成瘤试验研究CT120过表达对A549细胞生长的影响.结果:获得有效的鸡抗CT120抗体(IgY);CT120蛋白在不同肿瘤细胞系中表达程度不同,并在不同类型的肺癌组织中高表达;CT120基因异位表达显著促进NIH/3T3细胞的生长;同时CT120过表达对A549细胞在体内体外的生长有促进作用.结论:基因CT120与肺癌的发生发展有关,是一个人肺癌相关新基因.
