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28醇对MPP+ 致帕金森病细胞模型多巴胺摄取能力的影响
检测28醇对帕金森病(PD)MES23.5细胞模型摄取多巴胺(DA)能力的影响.MES23.5细胞培养24h后加入不同浓度的28醇孵育12h,之后向各组分别加入100μmol/L MPP+ ,在体外模拟帕金森病的神经损伤,孵育12h后测定各个组3H-DA摄取能力的变化.结果发现,MPP+对MES23.5细胞模型[3H]DA摄取能力有明显的抑制作用(P＜0.001);与模型组相比,给予10-6 和10-7mol/L浓度的28醇给药组DA摄取能力明显上升(P＜0.05),而10-8 mol/L 以下浓度的28醇给药组DA摄取能力与模型组相比无显著差异.结论:10-7mol/L以上浓度的28醇可显著减少MPP+对MES23.5细胞模型DA摄取能力的损害.
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苁蓉精对MPP+诱导多巴胺能神经细胞损伤后GSK-3β表达的影响
目的 观察苁蓉精水提物及苁蓉精纳米微粉对1-甲基-4-苯基吡啶离子(MPP+)诱导损伤的多巴胺能神经细胞MES23.5细胞中帕金森病相关蛋白α-突触核蛋白(α-synuclein)、糖原合成酶激酶-3β(GSK-3β)、Tau蛋白表达的影响,探讨苁蓉精治疗帕金森病的作用机制.方法 分别将苁蓉精水提物及纳米微粉经PBS溶解后加入培养基使终浓度为100、200、250 μg/mL,孵育MPP+诱导的PD模型细胞24 h后,并设模型对照(MPP+诱导的PD模型细胞,不加干预)及空白对照组(未经任何处理的MES23.5细胞),以MTT法检测细胞的存活率,Western Blot法测定各组细胞内msynuclein、GSK-3β、Tau蛋白表达.结果 同空白对照组比较,模型组及苁蓉精水提物及纳米微粉100、200、250 μg/mL组α-synuclein、GSK-3β及Tau蛋白的磷酸化水平均升高(分别P＜0.01、P＜0.05);与模型组比较,苁蓉精水提物及纳米微粉100、200、250 μg/mL组msynuclein、GSK-3β及Tau蛋白的磷酸化水平均显著降低(分别P＜0.01、P＜0.05).除苁蓉精纳米微粉100 μg/mL组GSK-3β磷酸化水平与苁蓉精水提物100 μg/mL组比较差异无统计学意义(P＞0.05)外,其余各苁蓉精纳米微粉组α-synuclein、GSK-3β及Tau蛋白的磷酸化水平均低于相同浓度的苁蓉精水提物组(分别P＜0.01、P＜0.05).结论 苁蓉精水提物及苁蓉精纳米微粉均能够减轻MPP+诱导的PD模型细胞的损伤,且苁蓉精纳米微粉的效果相对较好.其机制可能与苁蓉精可以减少α-synuclein的聚集,降低GSK-3β的活性,抑制Tau蛋白的过度磷酸化有关.
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淫羊藿苷减轻Mpp+对MES23.5细胞的神经毒性损伤
淫羊藿苷是传统中药淫羊藿的主要活性成分.研究显示淫羊藿苷可能是一个潜在的抗老年疾病的药物.本研究旨在探讨淫羊藿苷对Mpp+诱导的MES23.5细胞损伤的保护作用及其可能机制.细胞活力检测结果显示Mpp+可剂量依赖性地损伤MES23.5细胞,降低细胞存活率,淫羊藿苷可以显著抑制Mpp+所诱导的细胞毒性作用.此外,免疫细胞化学和免疫印迹结果显示淫羊藿苷可对抗Mpp+引起的酪氨酸羟化酶(TH)阳性细胞数的减少和蛋白水平的降低.流式细胞术结果显示,淫羊藿苷可以逆转Mpp+所导致的线粒体膜电位的降低.Real-time RT-PCR和Western blot结果显示,淫羊藿苷可逆转Mpp+所导致的Bax基因和蛋白表达水平的上调以及Bcl-2基因和蛋白表达水平的下调;同时,淫羊藿苷也可以抑制Mpp+所诱导的cleavedeaspase-3蛋白的表达水平.以上结果提示,淫羊藿苷可明显对抗Mpp+对MES23.5细胞的神经毒性作用,其作用机制可能与抗凋亡有关.
关键词： 淫羊藿苷 1-甲基-4-苯吡啶离子 MES23.5细胞
