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  • 板蓝根水提物S-03体外抑制甲、乙型流感病毒感染的实验研究

    作者:杨子峰;王玉涛;秦笙;招穗珊;赵韵诗;林青;关文达;黄群娣;莫自耀;李楚源;钟南山

    以水提法分离制备板蓝根水提物S-03分析其基本化学成分,并在狗肾细胞(MDCK)上分别接种人甲1、3型和乙型流感病毒标准株、临床分离株以及禽流感病毒,采用空斑减少和免疫荧光及血凝抑制实验方法,在预防、治疗和直接作用三种试验模式下探讨S-03体外对流感病毒的抑制作用.研究结果表明S-03的主要化学成分为糖类,多糖所占总重的比例高.S-03体外抗病毒药效显示:①预防模式:对各型流感病毒均无抑制作用;②治疗和直接作用模式:对不同亚型流感病毒均有一定程度的抑制作用,且直接作用(SI=2.5~16)效果优于治疗模式(SI=2.2~5.8);③血凝抑制试验:对不同亚型的人流感病毒血凝素有不同程度抑制作用(低抑制浓度为3.12~25 mg/mL),并且对禽流感病毒(H6N2、H7N3、H9N2)的血凝素也有一定的抑制作用(低抑制浓度25~50 mg/mL),其作用机制可能为抑制流感病毒表面的血凝素(HA),从而阻止病毒感染.

  • 流感病毒神经氨酸酶抑制剂筛选模型的建立和应用

    作者:曹鸿鹏;陶佩珍;杜冠华

    目的建立适用于高通量筛选的流感病毒神经氨酸酶(neuraminidase,NA)抑制剂筛选模型.方法从甲型及乙型流感病毒中制备神经氨酸酶,以2′-(4-methylumbelliferyl)-α-D-N-acetylneuraminic acid(MUNANA)作为底物,建立检测神经氨酸酶活性的荧光测定法及其抑制剂体外筛选方法,用高通量筛选系统对1 200个化合物与提取物进行初筛.结果神经氨酸酶酶促反应以pH 3.5,二价阳离子浓度为2~6 mmol*L-1及37℃孵育时酶活性佳;甲、乙型流感病毒不同株神经氨酸酶的米氏常数(Km)的范围为(4.89~5.94) μmol*L-1;初筛发现12个化合物对流感病毒神经氨酸酶有可重复的抑制活性.结论优化了神经氨酸酶反应体系,建立的体外模型可用于抗甲、乙型流感病毒药物的高通量筛选及酶抑制动力学的研究.

  • 流行性感冒病毒血凝抑制试验及其临床应用

    作者:刘定华;倪安平

    目的采用病毒培养与血凝抑制(HI)试验调查京津地区6所医院流行性感冒(流感)情况,评价HI试验的临床诊断价值.方法采用病毒培养检测60份流感样症状患者鼻吸液标本,确定阳性标本流感病毒型别;采用HI试验检测60组共120份血清(每组含急性期﹑恢复期血清各1份),比较急性期﹑恢复期血凝素IgG抗体效价有无≥4倍升高、判断所感染流感病毒型别及与培养结果是否符合.结果培养阳性率甲型流感病毒为25.0%,乙型流感病毒为15.0%;合计40.0%;血凝素抗体效价≥4倍升高率:A1/上海/7/99 1.67%,A3/福建/151/2000 26.67%,B/浙江/2/2001 1.67%,B/上海/20/2001 6.67%合计36.67%;HI试验诊断流感的敏感性(SN)、特异性(SP)、误诊率(FPR)、漏诊率(FNR)、正确率(л)Youden指数(YI)、阴阳性似然比(LR±)及阴阳性预测值(PV±)分别为66.67%、83.33%、16.67%、33.33%、76.67%、0.5000、0.4000、3.999、78.95%、72.72%.结论 HI试验测定流感患者急性期和恢复期血清的血凝素抗体水平可确诊流行性感冒,并能提供流感病毒分型报告.

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