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解毒祛瘀滋阴方对MRL/lpr狼疮小鼠CD4+T细胞MeCP2信号通路的影响
目的 探讨解毒祛瘀滋阴方治疗系统性红斑狼疮的可能作用机制.方法 30只MRL/lpr狼疮小鼠随机分成中药组、西药组、模型组各10只,10只C57 BL/6小鼠作为对照组.中药组予0.5g/ml浓度的解毒祛瘀滋阴方水煎剂灌胃,西药组予0.5 mg/ml浓度的醋酸泼尼松片混悬液灌胃,模型组和对照组予蒸馏水灌胃,均每次0.01 ml/g,每日1次,连续干预12周.干预结束后观察小鼠皮毛、活动及浅表淋巴结等一般状态,检测小鼠血清白细胞介素4 (IL-4)、γ干扰素(IFN-γ)水平变化;HE染色染色观察肾脏病理改变;检测小鼠脾脏CD4+T细胞甲基结合蛋白2(MeCP2) mRNA和蛋白的表达水平. 结果 与模型组比较,中药组小鼠肾脏病理损伤明显改善,血清IL-4、IFN-γ浓度水平降低,MeCP2 mRNA和蛋白表达水平明显升高(P ＜0.05或P＜0.01),且中药组MeCP2蛋白及mRNA表达水平升高较西药组明显(P＜0.05或P＜0.01).结论 解毒祛瘀滋阴方可能是通过激活MeCP2信号通路,进而抑制系统性红斑狼疮的发病.
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冠心病患者CD14+单核细胞总体DNA异常甲基化及其机制研究
目的 探讨冠心病患者外周血CD14+单核细胞基因组总体DNA异常甲基化及其机制.方法 密度梯度离心法和磁珠分选法分离试验组(冠心病患者)和对照组(非冠心病患者)外周血CD14+单核细胞.用基因组总体甲基化定量试剂盒检测DNA总体甲基化水平;用实时荧光定量聚合酶链式反应(qRT-PCR)检测DNA甲基转移酶(DNMTs)和甲基结合蛋白2(MBD2)的mRNA表达水平.结果 对照组与试验组CD14+单核细胞DNA总体甲基化水平分别为0.30±0.04,0.44±0.03,差异有统计学意义(P＜0.05).对照组与试验组DNMT1 mRNA表达水平分别为2.16±0.32,1.40±0.13,差异有统计学意义(P＜0.05);DNMT3A mRNA表达水平分别为0.56±0.05,0.89±0.12,差异有统计学意义(P＜0.05);DNMT3B mRNA表达水平分别为0.59±0.07,0.97±0.10,差异有统计学意义(P＜0.01);MBD2 mRNA表达水平分别为1.68±0.20,1.20±0.08,差异有统计学意义(P＜0.05).冠心病试验组中,CD14+单核细胞DNMT1的mRNA表达水平与DNA总体甲基化水平呈明显正相关(r =0.648),差异有统计学意义(P＜0.05);DNMT3B的mRNA表达水平与DNA总体甲基化水平呈明显正相关(r=0.700),差异有统计学意义(P＜0.05);MBD2的mRNA表达水平与DNA总体甲基化水平呈显著负相关(r=-0.540),差异有统计学意义(P＜0.05),而表达升高的DNMT3A与总体甲基化水平没有明显相关性(P＞0.05).结论 冠心病患者外周血CD14+单核细胞基因组DNA呈总体高甲基化,可能是DNMT1、DNMT3A和DNMT3B和MBD2共同作用的结果.
