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加味黄芪赤风汤含药血清对LPS诱导的小鼠肾小球系膜细胞ColⅣ、MMP-2及TIMP-2表达的影响
目的 探讨加味黄芪赤风汤对脂多糖(LPS)诱导的小鼠肾小球系膜细胞(glomerular mesangial cells,GMCs)细胞外基质(extracellular matrix,ECM)Ⅳ型胶原蛋白(collagenⅣ,ColⅣ)、基质金属蛋白酶2(matrix metalloproteinase-2,MMP-2)及基质金属蛋白酶抑制酶2(tissue inhibitor of metalloproteinase-2,TIMP-2)水平的影响.方法 采用血清药理学方法制备正常血清及替米沙坦、加味黄芪赤风汤高、中、低剂量含药血清.体外培养GMCs,以LPS作为刺激因子,诱导系膜细胞增殖.将GMCs分为正常组、模型组、替米沙坦组及加味黄芪赤风汤高、中、低剂量组(简称中药高、中、低剂量组).采用ELISA法检测各组GMCs上清液中ColⅣ含量,Western blot法检测GMCs中MMP-2及TIMP-2蛋白表达水平.结果 与正常组比较,LPS刺激72 h后,模型组GMCs上清ColⅣ含量明显增多,系膜细胞MMP-2及TIMP-2蛋白表达均明显上调,MMP-2/TIMP-2比例下调(均P＜0.01);与模型组比较,中药高、中剂量组及替米沙坦组ColⅣ含量明显减少(P＜0.01);中药中、低剂量组MMP-2蛋白表达明显下调(P ＜0.01,P＜0.05);替米沙坦组及中药高、中、低剂量组TIMP-2蛋白表达均下调(P＜0.01).中药高剂量组TIMP-2蛋白表达水平明显低于中药低剂量组(P＜0.01);替米沙坦组、中药高、中剂量组MMP-2/TIMP-2比例明显上调(P＜0.01).结论 加味黄芪赤风汤可调节LPS诱导的GMSc ECM中MMP-2/TIMP-2比例失调,抑制ECM中ColⅣ的过度产生,促进ECM降解,减少ECM积聚,从而延缓肾小球硬化的进程.
