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大孔树脂与ZTC联用纯化白子草总黄酮的研究
目的:考察大孔吸附树脂与ZTC天然澄清剂联用对白子草黄酮提取液的纯化效果,确定理想的纯化工艺.方法:采用紫外分光光度法测定总黄酮含量,以总黄酮保留率和转移率为指标,考察大孔树脂型号、上样液和药液浓度、上样和清洗及洗脱流速、药材树脂(干)比、树脂柱径高比、清洗液pH等影响因素.结果:优化后纯化条件为大孔树脂型号HPD600,上样液和清洗液pH6,药液浓度0.25 g·mL-1,上柱吸附流速2 BV h-1,药材树脂(干)比4∶1,树脂柱径高比1∶10,清洗和洗脱流速5 BV·h-1,清洗液和洗脱液用量分别为5,9 BV,洗脱溶剂70％乙醇.在该纯化条件下,总黄酮纯度由粗提物的2.47％提高到24.2％.结论:大孔吸树脂与Ⅱ-ZTC1+1天然澄清剂联用既可提高产品内在质量,又能缩短生产周期、减少有机溶剂的使用、降低成本,值得推广.
关键词： 白子草 总黄酮 大孔树脂 Ⅱ型ZTC1+1天然澄清剂 -
白子草多糖的分离、纯化及初步分析
对白子草中的多糖进行分离纯化,并对得到的多糖组分的理化性质进行分析.将脱脂后的白子草药材经热水提取,乙醇沉淀,木瓜蛋白酶-Sevag法去蛋白后,再经DEAE-Sepharose Fast Flow离子交换柱色谱分离,透析除盐纯化得白子草多糖,采用高效液相色谱法,红外光谱和1 H-NMR对其进行组成研究和分析.白子草多糖中的GDPs-2的纯度为87.3％,相对分子质量为2.03×104 Da;GDPs-3的纯度为90.9％,相对分子质量为4.29×104 Da.红外光谱无法确定GDPs-2是否有α构型的呋喃糖苷,但提示GDPs-3可能有α构型的呋喃糖苷键,1H-NMR分析初步判断GDPs-2和GDPs-3的糖苷键连接方式均为α型.GDPs-2由葡萄糖醛酸和木糖组成,摩尔比为1.1∶0.63;GDPs-3由鼠李糖、葡萄糖醛酸、半乳糖、木糖和半乳糖醛酸组成,摩尔比为0.32∶6.0∶0.21∶ 1.75∶4.3.
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白子草总黄酮及总多糖降血糖有效部位的提取工艺研究
目的：研究建立白子草总黄酮及总多糖降血糖有效部位的提取工艺。方法在单因素试验的基础上，考察提取次数、药材粒径、浸泡时间、料／液比、乙醇浓度、提取时间对白子草总黄酮提取率的影响，并通过L 9（3）4正交试验优化总黄酮佳提取工艺；以前期研究为基础，结合L9（3）4正交试验，优化总多糖佳提取工艺。结果白子草总黄酮佳提取工艺为：药材粗粉加20倍80％乙醇，浸泡0．5h，回流提取2次，每次1．0h ；总多糖佳提取工艺为：醇提后药渣加20倍纯净水，80℃回流提取2次，每次1．0 h。该条件下白子草总黄酮及总多糖提取率均大于80％。结论本研究建立的白子草总黄酮及总多糖降血糖有效部位提取工艺稳定、重复性好，为白子草降血糖活性研究奠定了实验基础。
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紫外分光光度法测定白子草中总黄酮含量
目的 测定白子草中总黄酮含量,从而对白子草的质量进行控制. 方法 采用紫外分光光度法测定. 结果 芦丁的线性范围为8.8-52.6μg·mL-1.回归方程为conc=0.0004+0.0801×Abs.相关系数r=0.9999.加样回收率为102.5%RSD为3.0%. 结论 该法简便易行,快速,准确,可以用于本品质量控制方法之一.
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ZTC与大孔树脂联用纯化白子草总多糖的研究
目的 考察ZTC天然澄清剂联合大孔树脂对白子草总多糖的纯化效果,确定白子草总多糖的纯化工艺.方法 以絮体形态、溶液状态、多糖转移率为指标,考察加样顺序、药液浓度、药液pH、絮凝温度、絮凝剂用量等因素对ZTC总多糖纯化效果的影响;以多糖转移率为指标,考察大孔树脂型号、药液pH、药液浓度、吸附流速、药材树脂(干)比、树脂柱径高比、洗脱液pH、洗脱流速等因素对大孔树脂总多糖纯化效果的影响.结果 建立了ZTC纯化白子草总多糖的工艺,白子草总多糖纯度从26.34％提高至48.86％;建立了大孔树脂纯化白子草总多糖的工艺,白子草总多糖纯度从48.86％提高至65.26％.结论 本研究采用ZTC天然澄清剂联合大孔树脂技术建立了白子草总多糖的纯化工艺,为白子草降血糖活性成分的开发及进一步利用奠定了基础.
