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从患者胆汁分离的大肠埃希菌中质粒介导的氟喹诺酮类耐药基因的检测
目的 分析浙江省衢州市开化县第二人民医院消化内科胆汁分离的大肠埃希菌的耐药特点并调查质粒介导的喹诺酮类耐药基因的分布情况和流行特点.方法 收集该院消化内科患者2011年1月至2013年6月分离的大肠埃希菌724株,均为非重复性菌株,采用全自动微生物分析仪器VITEK 2 COMPACT进行细菌鉴定及药物敏感性分析,采用聚合酶链反应(polymerase chain reaction,PCR)分析质粒介导的氟喹诺酮类耐药基因(plasmidmediated quinolone resistance genes,PMQR)如qnrA、qnrB、qnrS、aac(6’)-Ib-cr和qepA基因的流行特点.结果 胆源性大肠埃希菌的构成比达18.65％ (135/724),其对环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率高达61.5％ (83/135)和55.6％(75/135),未检出碳青霉烯类抗生素耐药菌株;PCR检测PMQR基因结果显示:135株胆源性大肠埃希菌中,121株(89.63％) qnrA1基因阳性,45株(33.33％) qnrB4基因阳性,32株(23.70％) qnrB6基因阳性,43株(31.85％) qnrS1基因阳性,34株(25.19％) aac(6’)-Ib-cr基因阳性菌株,未检出qepA基因;其中45株(33.33％)同时携带qnrA1、qnrB4基因,32株(23.70％)同时携带qnrA1、qnrB6,25株(18.52％)同时携带qnrA1、qnrB4、qnrS1,21株(15.56％)同时携带qnrA1、qnrB4、qnrS1、acc(6’)-Ib-cr,12株(100％)同时携带qnrA1、qnrB6、qnrS1、acc(6’)-Ib-cr,且环丙沙星和左氧氟沙星的耐药率随着PMQR基因组合种类的增多而增多.结论 消化内科胆汁分离的大肠埃希菌氟喹诺酮类抗生素耐药严重,耐药基因主要以qnrA1为主,qnrB4和qnrB6次之,且存在多种PMQR基因组合形式,这些潜在播散的氟喹诺酮耐药基因对于临床胆道感染的治疗有很大的挑战.
关键词： 大肠埃希菌 质粒介导喹诺酮类耐药基因 胆汁 -
新质粒介导喹诺酮耐药基因qnrB24的基因分析
目的：对新的质粒介导喹诺酮耐药基因（qnrB24）进行相关研究和分析。方法对新发现的qnrB24基因阳性菌株进行转移接合实验，了解qnrB24对喹诺酮类药物的耐药性，碱裂解法提取接合子质粒，Southern blot明确质粒大小。采用热不对称交错聚合酶链反应（PCR）技术研究基因5′端以及3′端未知侧翼碱基序列。结果这个突变基因命名为qnrB24（Genbank登录号HM192542）。药敏试验结果显示携带qnrB24基因接合子对环丙沙星的小抑菌浓度（M IC ）值为0．125μg／m L ，左氧氟沙星M IC值为0．190μg／m L。接合子对常见氟喹诺酮类抗菌药物的敏感性较大肠杆菌J53受体菌下降约8～11倍，接合子耐药水平低于临床分离菌株。Southern杂交显示该基因位于约60．0 Kb质粒上。热不对称交错PCR结果显示，qnrB24基因5′端为假定的转座酶。结论 qnrB24通过质粒介导引起细菌对喹诺酮类药物的耐药性上升，容易发展成高水平耐药，因此需要监测其在细菌中的流行性。
关键词： 质粒介导喹诺酮类耐药基因 氟喹诺酮耐药 qnrB24 功能分析
