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福氏志贺菌Xv血清型聚合酶链反应鉴定方法的建立及应用
目的 建立福氏志贺菌Xv血清型聚合酶链反应(PCR)鉴定方法.方法 根据福氏志贺菌Xv血清型O抗结构,针对O抗合成基因wzx、7;8群抗原决定基因gtrX和MASF Ⅳ-1抗原决定基因opt,建立PCR扩增鉴定方法.并应用该方法对139株福氏志贺菌临床分离株进行血清型检测.结果 建立一种福氏志贺菌Xv血清型PCR鉴定方法,该体系在一个反应中包括3对引物,Xv血清型PCR扩增全部为阳性,可将Xv血清型与目前已知的其他18种福氏志贺菌血清型完全区分.非福氏志贺菌菌属及腹泻相关菌属菌株检测结果发现无任何PCR扩增产物.对139株不同血清型福氏志贺菌临床分离株的鉴定结果显示,该方法可将Xv血清型鉴定,与血清凝集结果一致.结论 本研究建立的福氏志贺菌Xv血清型PCR鉴定方法具有快速、特异的优点,可以用于检测和监测.
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福氏志贺菌血清型单重PCR鉴定方法的建立及应用
目的 建立基于O抗修饰基因的福氏志贺菌血清型PCR鉴定方法.方法 根据福氏志贺菌O抗原合成及修饰特异基因设计引物,以常见的14种福氏志贺菌血清型(包括1a、1b、1c、2a、2b、3a、3b、4a、4b、5a、Y、X、Xv和F6)为标准菌株,建立福氏志贺菌血清型单重PCR鉴定方法；并以痢疾志贺菌、宋内志贺菌、鲍氏志贺菌和腹泻相关的其他菌属菌株验证特异性；应用该方法对106株福氏志贺菌临床分离株进行PCR血清分型.结果 建立一种福氏志贺菌血清型单重PCR鉴定方法,通过8个PCR反应,能够鉴定目前已知的15种血清型中的14种(Xv除外).检测灵敏度在10 pg至1 ng DNA(20μl反应体系).对106株福氏志贺菌临床分离株的检测结果提示,PCR分型方法与玻片凝集法具有很高的一致性.结论 本研究建立的福氏志贺菌血清型单重PCR鉴定方法具有特异性、灵敏性,可用于临床检测.
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福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法的建立及应用
目的 建立福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法.方法 根据福氏志贺菌4av和Yv血清型O抗结构,针对O抗合成基因wzx、Ⅳ型抗原决定基因gtrⅣ和MASF Ⅳ-1抗原决定基因opt,建立血清型4av和Yv的PCR鉴定方法.并应用该方法对126株福氏志贺菌临床分离株进行血清型检测.结果 建立了一种福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法,在一个反应中包括4对引物,Yv血清型PCR扩增为wzx及opt阳性;4av血清型PCR扩增为wzz、opt及gtrⅣ阳性.该方法可将4av和Yv血清型与目前已知的其他福氏志贺菌血清型完全区分.对126株不同血清型福氏志贺菌临床分离株的鉴定结果显示,该方法具有很好的特异性.结论 本研究建立的福氏志贺菌4av和Yv血清型PCR鉴定方法,可以用于志贺菌检测和监测.
