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SYBR Green Ⅰ RT-PCR定量检测葛根芩连方对Wa株轮状病毒感染乳鼠小肠上皮SLC5A1 mRNA表达的影响
目的:探讨葛根芩连方(GGQL)治疗Wa株轮状病毒(RV)感染性腹泻的作用机制.方法:建立RV-Wa感染4天龄昆明小鼠乳鼠的腹泻模型,采用实时SYBR Green Ⅰ嵌合荧光定量RT-PCR方法,检测GGQL对乳鼠小肠组织钠离子葡萄糖联合转运子(SLC5A1) mRNA的表达差异变化.结果:RV感染乳鼠小肠SLC5A1 mRNA表达降低；GGQL组小肠组织SLC5A1 mRNA表达明显升高.结论:GGQL对感染RV感染性乳鼠腹泻的治疗作用可能与上调小肠SLC5A1 mRNA的表达有关.
关键词： 葛根芩连方 Wa株轮状病毒 腹泻 钠离子葡萄糖联合转运子mRNA -
Wa株轮状病毒感染昆明小鼠乳鼠腹泻模型的建立及影响因素考察
目的:建立人源性Wa株轮状病毒感染昆明小鼠乳鼠腹泻动物模型.方法:采用不同接种方式(口服、注射)、不同滴度、不同剂量的Wa株轮状病毒感染4d龄昆明小鼠乳鼠,观察昆明小鼠乳鼠的体征反应、腹泻率和腹泻程度；选择腹泻率和腹泻程度较高的条件进行模型的稳定性考察,观察体征反应、腹泻率、腹泻程度、小肠形态学等指标改变.结果:采用强饲法,Wa株轮状病毒滴度为10-33/25μL TCID50,被轮状病毒攻击24 h后出现腹泻表现,低剂量(50μL/只)病毒组及中剂量(100μL/只)病毒组腹泻率及腹泻程度较低,高剂量(200μL/只)病毒组感染后第1天(1 dpi)腹泻率可达80％,腹泻程度达3.0,连续4d保持腹泻状态,在各剂量组中腹泻率和腹泻程度高；采用高剂量病毒组的实验方法,扩大造模动物的数量进行验证,1 dpi乳鼠腹泻率为80.0％,腹泻程度达3.1,并连续4d保持腹泻状态.结论:4d龄昆明小鼠乳鼠被Wa株轮状病毒经口攻击后,病毒能够使昆明小鼠乳鼠出现腹泻表现,且腹泻率和腹泻程度与病毒滴度、剂量相关.所建模型方法简便、重现性好,可作为比较理想的动物模型用于抗RV感染的药物治疗效果评价.
