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广西虎纹捕鸟蛛毒的研究概况
在各种蜘蛛毒素中发现有多种酶类以及对哺乳动物,昆虫神经系统有选择性作用的一些神经毒素.虎纹捕鸟蛛是在云南、广西一带发现的一个捕鸟蛛科新种,其粗毒中主要含有HWTX-Ⅰ,HWTX-Ⅱ,HWTX-Ⅴ,HWTX-Ⅺ等几种神经毒素,还有一些多肽类(毒液的主要成分都为相对分子质量2×103～9×103的多肽)、蛋白质和低相对分子质量物质所构成的复杂混合物,具有多种活性及生理作用.在治疗癫痛病、癌症、脑溢血、神经肌肉疼痛等方面有着广泛应用前景,作者对虎纹捕鸟蛛的来源、毒性成分及其应用、毒性成分的药理及研究展望进行了文献整理.
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一种富含半胱氨酸的蜘蛛多肽基因的克隆和初步表达
目的 克隆编码虎纹捕鸟蛛多肽的基因并表达蜘蛛多肽,为研究其生物学功能奠定基础. 方法通过构建和随机测序毒腺cDNA文库,克隆编码毒素多肽的基因;构建真核表达质粒,利用酿酒酵母S78株表达系统分泌表达,表达产物进行Tricine SDS-PAGE鉴定. 结果克隆到一种编码富含半胱氨酸的多肽的新基因,命名为HWTX-XIVa2基因;构建的真核表达质粒转化酵母S78后表达6.5 ku的多肽. 结论构建并筛选毒腺cDNA文库是发现毒素多肽基因的一种有效方法,利用基因工程表达是获得蜘蛛多肽的一种有效手段.
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虎纹捕鸟蛛毒素对人结肠癌SW480细胞体外增殖的影响
目的 探讨虎纹捕鸟蛛毒素对结肠癌SW480细胞体外增殖的影响.方法 以体外培养的人结肠癌SW480细胞株为实验模型,以不同浓度的虎纹捕鸟蛛毒素对SW480细胞进行体外干预,通过MTT药物敏感实验检测其抑制率及计算IC50;镜下观察经Hoechst 33342染色后的细胞形态变化;流式细胞仪观测经AnnexinV-FITC/PI双染的细胞状态的变化;分光光度法测定Caspase-3的相对活化倍数的变化.结果 MTT药物敏感实验显示,5～ 100 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒对人结肠癌SW480细胞有抑制作用,且呈一定剂量效应关系.其48 h半抑制浓度(IC50)为43.68 mg/ml;显微镜下可见虎纹捕鸟蛛粗毒干预后的SW480细胞数量明显减少,细胞形态各异,并出现细胞碎片;流式细胞结果显示:10 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒诱导的SW480细胞凋亡率高,达(57.66±20.44)％;50 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒干预后,SW480细胞坏死率高,达(25.36±15.03)％;100 mg/ml虎纹捕鸟蛛粗毒干预后Caspase-3活化明显.结论 虎纹捕鸟蛛粗毒对人结肠癌SW480细胞体外增殖具有抑制作用.
