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UPLC-PDA测定不同产地墨旱莲中的4种皂苷
目的:建立墨旱莲中旱莲苷C,旱莲苷IV,旱莲苷A,刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法.方法:样品用50％甲醇超声提取,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7.μm),流动相乙腈-水,流速0.3mL·min-1,检测波长210 nm,柱温30℃,进样量5μL.结果:旱莲苷C,旱莲苷IV,旱莲苷A,刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷4种皂苷成分的加样回收率均在95％ ～ 105％,其RSD均＜3％.结论:该方法快速、简便、准确,可用于墨旱莲中旱莲苷C,旱莲苷IV,旱莲苷A,刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定.
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旱莲苷A对HepG-2细胞凋亡作用的研究
目的研究旱莲苷A(Ecliptasaponin A)对肝癌细胞(HepG-2)的抑制增殖作用,探讨其诱导HepG-2细胞凋亡的机制.方法 旱莲苷A处理HepG-2细胞后,MTT法检测细胞增殖,AO/EB染色法观察细胞凋亡,流式细胞仪检测细胞凋亡和周期变化,DCFH-DA荧光探针法检测细胞内ROS,JC-1荧光探针法检测细胞线粒体膜电位的变化.Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达情况.结果 旱莲苷A处理细胞48 h后,旱莲苷A能明显抑制 HepG-2细胞的生长,且呈浓度依赖性增长趋势,其 IC50为(29.8 ± 1.6) μmol/L.与对照组相比,浓度为12.5、25 μmol/L的旱莲苷A组AO/EB染色可看到凋亡细胞明显增加.流式细胞仪检测显示12.5、25 μmol/L旱莲苷A组细胞周期被阻滞在S期的比例增加,分别为24.03%、43.19%,其细胞早期凋亡比例分别增加了4.06%和11.82%.浓度为12.5 μmol/L、25 μmol/L的旱莲苷A组细胞内ROS水平明显增加,细胞线粒体膜电位显著下降,且随着旱莲苷A浓度的增加,线粒体膜电位下降更为明显.Western blot结果显示,旱莲苷 A组凋亡相关蛋白 Bcl-2表达减少,Bak表达增加.结论 旱莲苷A可有效抑制HepG-2细胞增殖,其作用机制可能是通过线粒体途径抑制Bcl-2表达,促进Bak和Caspase-3的表达,诱导细胞凋亡.
