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宫血停颗粒质量标准的研究
目的:建立宫血停颗粒的质量控制方法.方法:采用TLC法鉴别制剂中的墨旱莲和益母草,采用HPLC-ELSD法测定制剂中黄芪甲苷的含量.结果:鉴别方法专属性强,含量测定方法黄芪甲苷在0.20～2.50μg间呈良好的线性关系,宫血停颗粒中黄芪甲苷的平均回收率为101.0％,RSD值为1.7％.结论:该方法简便、准确、分离效果好,可用于宫血停颗粒的质量评价.
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中药墨旱莲的质量标准研究
目的 对中药材墨旱莲中有效成分进行定性定量鉴别,对其水分、总灰分、酸不溶性灰分、浸出物及重金属含量进行定量测定,完善墨旱莲药材的质量标准.方法 采用薄层色谱法定性鉴别墨旱莲中的蟛蜞菊内酯,采用高效液相色谱法定量测定蟛蜞菊内酯含量,采用杂质检查法、烘干法、灰分测定法、浸出物测定法、重金属检查法进行常规项目检查.结果 10批墨旱莲样品中MHLS-005的蟛蜞菊内酯含量低于《中华人民共和国药典》规定的 0.04%,MHLC-001 酸不溶性灰分的含量高于《中华人民共和国药典》标准,MHLS-004和MHLS-006中水分含量高于《中华人民共和国药典》规定的标准.结论 所建立的方法简便、准确,可作为质量标准以控制墨旱莲药材的质量.
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墨旱莲在变应性鼻炎中的应用体会
墨旱莲可滋补肝肾、凉血止血,历代医家对其药用价值及临床应用多有研究,笔者跟从严道南教授抄方学习,结合案例介绍墨旱莲在严道南教授治疗变应性鼻炎中的应用价值,以供临床参考.
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响应曲面法优化墨旱莲三萜总皂苷提取工艺研究
目的：利用响应曲面法优化墨旱莲三萜总皂苷提取过程，比较普通粉碎与超微粉碎对墨旱莲三萜总皂苷提取过程的影响。方法通过单因素试验探讨了粉碎度、提取时间及乙醇体积分数对墨旱莲三萜总皂苷提取率的影响，利用响应曲面法优化提取工艺。结果佳提取工艺参数：药材为超微粉碎12分钟的粉末，提取溶剂为70%的乙醇溶液，提取时间为44分钟。结论超微粉碎技术可显著提高墨旱莲三萜总皂苷的提取率，所优选提取工艺稳定可行，适于工业化推广。
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墨旱莲的化学成分
目的:对中药墨旱莲的化学成分进行分离和鉴定.方法:用色谱法和波谱解析方法对墨旱莲的化学成分进行分离和结构鉴定.结果:从中分离得到9个化合物:蟛蜞菊内酯(Ⅰ),异去甲基蟛蜞菊内酯(Ⅱ),3-酮-16α-羟基-12-烯-28-齐墩果酸(Ⅲ),刺囊酸(Ⅳ),3,16,21-三羟基-12-烯-28-齐墩果酸(Ⅴ),旱莲苷A(Ⅵ),醴肠醛(Ⅶ),豆甾醇(Ⅷ)和β-树脂醇(Ⅸ).结论:化合物Ⅲ和Ⅴ均为首次从鳢肠属植物中分离得到.
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UPLC-PDA测定不同产地墨旱莲中的4种皂苷
目的:建立墨旱莲中旱莲苷C,旱莲苷IV,旱莲苷A,刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定方法.方法:样品用50％甲醇超声提取,采用Waters ACQUITY UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm×150 mm,1.7.μm),流动相乙腈-水,流速0.3mL·min-1,检测波长210 nm,柱温30℃,进样量5μL.结果:旱莲苷C,旱莲苷IV,旱莲苷A,刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷4种皂苷成分的加样回收率均在95％ ～ 105％,其RSD均＜3％.结论:该方法快速、简便、准确,可用于墨旱莲中旱莲苷C,旱莲苷IV,旱莲苷A,刺囊酸-28-O-β-D-葡萄糖苷的含量测定.
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二至丸考源及药理作用研究进展
对二至丸的来源和药理作用研究进行文献整理和分析.通过查阅古代医药文献及中国知网数据库,对二至丸方剂的来源和在药理作用研究方面取得的新进展,进行归纳整理并分类汇总.考证二至丸出自明代《扶寿精方》；现代药理作用表明,二至丸具有保肝降酶、抗肝纤维化、抗衰老、调节免疫机能、缩短血液凝血时间、改善血液流变性、抑制肿瘤、益智、抗炎、降血糖、抗疲劳等作用.近年来对其保肝作用研究较多,还需加强补肾滋阴等其他药理作用的研究,建立相关动物模型.建议对二至丸进行深入的作用机制研究,加强药代动力学及代谢组学研究,明确其发挥药效作用的物质基础,以期为二至丸临床应用和进一步开发提供依据.
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基于5种特征性成分综合评价二至丸的质量
目的:建立二至丸中5种特征性成分特女贞苷、红景天苷、酪醇、木犀草素、蟛蜞菊内酯同时检测的含量测定方法, 并据此评价所收集的11批二至丸样品的质量.方法:采用Phenomenex Gemini C18色谱柱 (4.6 mm×250 mm, 5μm), 流动相乙腈 (A) -0.2％甲酸水溶液 (B) 梯度洗脱 (015 min, 10％30％A;1525 min, 30％33％A;2530 min, 33％A) .流速1 mL·min-1, 检测波长225 nm和349 nm, 柱温30℃.结果:5个成分的分离度良好, 红景天苷、酪醇、特女贞苷、木犀草素和蟛蜞菊内酯的线性范围依次为202.5512 153, 84.555 073, 244.3014 657.72, 2.56153.72, 2.32139.2 ng.加样回收率平均值处于95.61％103.47％, RSD均＜2.0％.结论:建立的含量测定方法简便、准确, 重复性好, 可用于市售二至丸样品的含量测定和质量控制.11批样品中5个特征性成分含量差异较大, 特女贞苷含量差异＞60倍, 低值0.15 mg·g-1, 高值10.22 mg·g-1, 其原因可能与原料质量和执行标准等因素有一定关系.
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反相高效液相色谱法测定墨旱莲中齐墩果酸的含量
目的:建立测定墨旱莲中齐墩果酸的含量的高效液相色谱法.方法:采用Phenomene×C18柱(4.6 mm×250mm,5μm),流动相为乙腈-0.1%磷酸水溶液(90:10),检测波长210nm,流速1.0 ml/min,柱温为30℃,进样量为20 μl.结果:齐墩果酸在0.569-3.414μ g内峰面积与其质量浓度有良好的线性关系(r=0.9999);平均加样回收率为98.40%(RSD=2.44%).结论:该方法简便、快速、准确,可作为墨旱莲质量控制的一个有效方法.
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基于“组分结构”理论的8种墨旱莲乙酸乙酯提取物对NHBE细胞保护作用的比较
基于“组分结构”理论对来源不同的墨旱莲乙酸乙酯提取物(EAEEP)中活性成分进行分析比较,研究其保护正常人支气管上皮(normal human bronchial epithelial,NHBE)细胞的物质基础构成.以MTT法比较不同EAEEP对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)诱导的NHBE细胞保护作用,并采用UPLC分析不同EAEEP中酚酸、香豆草醚及黄酮类组分的含量.结果发现,8种EAEEP(0～ 200 mg·L-1)对NHBE细胞均有一定保护作用,并存在统计差异.其中,保护作用较强的是EAEEPⅦ和EAEEPⅧ,其EC5o分别为46.97,56.29 mg·L-1.UPLC分析显示,8种EAEEP中酚酸、香豆草醚及黄酮类组分的含量存在显著差异.而作用强的EAEEPⅦ(89.15 mg·L-1)和EAEEPⅧ(57.44mg·L-1)质量总量却并非高,高的为EAEEPⅢ(132.25 mg·L-1).结合“组分结构”理论,分析发现EAEEPⅦ和EAEEPⅧ中酚酸、香豆草醚及黄酮类组分的质量结构与其他样品显著不同,分别为1.0∶1.0∶0.5和1.0∶1.9∶0.8.提示EAEEP中可能存在特定的优“组分结构”关系,可为其物质基础研究及质量控制提供参考.
关键词： 墨旱莲 组分结构 超高效液相色谱(UPLC) 烟雾提取物 -
墨旱莲对香烟提取物杀伤NHBE细胞的保护作用及机制
目的:研究墨旱莲提取物对香烟烟雾提取物(cigarette smoke extract,CSE)作用的正常肺细胞NHBE细胞的保护作用及其机制.方法:MTT法检测墨旱莲提取物对CSE诱导的NHBE细胞增殖的影响,DTNB比色法测定GSH含量,CDNB比色法检测GST活力,NADPH与2,6-二氯靛酚钠(DCIP)测试NQ01活力,Western blot测定蛋白的表达.结果:墨旱莲提取物可以降低CSE对NHBE细胞增殖的抑制作用；恢复由CSE引起的细胞内GSH水平下降,降低诱导细胞中GST与NQO1活力及NQ01蛋白表达.结论:墨旱莲能够减少CSE对NHBE细胞的损伤,其机制可能与Ⅱ相解毒酶相关.
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UPLC同时测定墨旱莲药材中8种成分的含量
建立一种超高效液相色谱法同时测定墨旱莲中的异槲皮苷、木犀草苷、异去甲蟛蜞菊内酯、异绿原酸A、异绿原酸C、木犀草素、蟛蜞菊内酯、芹菜素8种成分含量的方法.采用Waters Acquity UPLC BEH C18色谱柱(2.1 mm x100 mm,1.7 μm),流动相A为乙腈,B为0.1％的甲酸水,梯度洗脱条件:0～4 min,10％ ～ 13％ A;4～ 10 min,13％ ～16％ A;10～ 13 min,16％ ～25％ A;13～17 min,25％～28％ A;17～20 min,28％ ～40％ A;20～25 min,40％～95％A.流速:0.3 mL·min-1;柱温35℃;检测波长350 nm.研究结果表明各指标成分之间分离度良好,在选定的浓度范围内线性关系良好(r≥0.999 0),平均加样回收率(n=6)在96.60％ ～ 103.4％,RSD为0.86％ ～ 2.4％.所建立的UPLC同时测定墨旱莲药材中8种指标成分的含量的方法回收率较好,重复性、稳定性良好,为墨旱莲的鉴别及质量评价提供了科学依据.
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中药墨旱莲化学成分研究
利用多种色谱分离技术从中药墨旱莲的95％乙醇提取物中分离得到22个单体化合物,并利用波谱学技术以及必要的化学手段鉴定了全部化合物的结构,分别为墨旱莲木脂素A(1)、旱莲苷Ⅰ(2)、旱莲苷Ⅱ(3)、刺囊酸(4)、3-oxo-16α-hydrox-y-olean-12-en-28-oic acid(5)、金合欢素-7-O-芦丁糖苷(6)、木犀草苷(7)、芹菜素(8)、木犀草素(9)、金合欢素(10)、黄芩新素Ⅱ(11)、山柰酚(12)、山柰素(13)、槲皮素(14)、4 7,7-dihydroxyl-3',6'-dimethoxylisoflavone-7-O-glucoside(15)、α-醛基-三聚噻吩(16)、5-hydroxymethyl-(2,2',5',2")-terthienyl tiglate(17)、补骨脂素(18)、异补骨脂素(19)、蟛蜞菊内酯(20)、crinumaquine(21)、2,3,9,12-tetramethoxyprotoberberine(22).其中,1是个新木脂素类化合物,5,6,10～13,15,18,19,21和22为首次从该植物种分离得到.
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高效液相色谱法测定安神补心丸中丹参酮ⅡA的含量
安神补心丸由丹参、五味子、石菖蒲、安神膏(取合欢皮、菟丝子、墨旱莲、女贞子、首乌藤、地黄、珍珠经水煮两次后浓缩制成的浸膏)组成,具有养心安神的功能,临床上用于阴血不足引起的心悸,失眠,头晕耳鸣.为<中国药典>2000年版一部收载[1].现行药典标准中仅收载了丹参的薄层鉴别方法,未见含量测定方法的报道.方中丹参为君药,其有效成分为丹参酮ⅡA,本试验利用高效液相色谱法对丹参酮ⅡA进行了含量测定.
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首乌丸致肝功能损害1例
患者,男,17岁,因少白头,自购首乌丸(制何首乌、地黄、牛膝、桑椹、女贞子、墨旱莲、桑叶、黑芝麻、菟丝子、金樱子、补骨脂、豨莶草、金银花;甘肃天水歧黄药业有限责任公司,批号050407,另一批号不详),口服,1次6 g,1日2次,2005年4月20日开始,服药40 d.2005年5月30日无明显诱因出现乏力、纳差、食欲不振、厌油.自认为学习劳累所致,未经治疗.上述症状逐日加重,6月2日出现尿黄、皮肤、巩膜黄染.
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白花蛇舌草治疗湿疹
白花蛇舌草味苦、甘,性寒,归心、肺、脾、肝经,有清热解毒、利湿之功效.我们临床上用其治疗湿疹收到很好的疗效,举例如下.例1:张某某,男,59岁,因服食鱼虾,出现周身瘙痒3、天来诊,现周身瘙痒剧烈,双肘部和大腿内侧呈片状丘疹,有白色浆疱,淡黄色液体渗出,伴口干喜饮,夜间诸症加重,无法入睡,平素喜烟酒.舌红苔黄腻,脉弦数.诊断:急性湿疹,证属湿热夹风蕴发肌肤.治以清热利湿祛风.处方:白花蛇舌草60g,金银花20g,连翘20g,薏苡仁20g,防风20g,陈皮15g,土茯苓10g,生地黄20g,大青叶30g,甘草10g,每日1剂.服用3剂后,症状明显缓解,渗出处已渐结痂,夜间可入睡;继服上方3剂,自觉偶有瘙痒,周身乏力,原方加墨旱莲15g,当归15g,继服6剂,诸症痊愈.
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旱黑口服液延缓皮肤组织衰老的作用
旱黑口服液是由墨旱莲和黑豆组成,主要有养肝益肾、凉血止血的功效,<本草纲目>记载墨旱莲乌须发,益肾阴,味甘、酸、寒.归肾、肝经,临床观察其有抗衰老作用.我们采用D-半乳糖衰老模型小鼠观察了旱黑口服液对皮肤衰老相关指标的影响.现将结果报告如下.
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抑瘤饮影响S180瘤组织中Bcl2和Bax表达的动态研究
凋亡相关基因Bcl2和Bax的表达与肿瘤细胞凋亡与否密切相关.抑瘤饮是依中医抗肿瘤理论组成的中药复方水煎剂,其主要成分为:黄芪、党参、云芝、三七、仙鹤草、墨旱莲、鸡血藤、卷柏、大枣、陈皮等;临床和动物实验显示其在体内确有一定抗肿瘤效果,但尚不知其在体内是否对肿瘤细胞凋亡相关基因表达有影响.
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墨旱莲对维甲酸所致大鼠骨质疏松症的药效学研究
目的 探讨中药墨旱莲对维甲酸所致大鼠骨质疏松症的药效作用.方法 3月龄SPF级雌性SD大鼠60只,随机分为正常对照组、模型组(RA,75 mg/(kg·d))、墨旱莲组(1.46、0.73、0.37 g/(kg·d))、仙灵骨葆组(1.5 g/(kg·d)).除正常组外,其余各组给予维甲酸造模2 w,造模同时给予墨旱莲、仙灵骨葆.实验过程每日称量体重,连续给药6w后测定血钙(S-Ca)、血磷(S-P)、血清中碱性磷酸酶(ALP)和骨钙素(OCN)的水平,尿液中钙(U-Ca)、磷(U-P)、脱氧吡啶啉(DPD)的水平.采用DXA型骨密度仪检测大鼠的股骨、第4椎骨、胫骨的骨密度(bone mineral density,BMD).三点弯曲试验检测左侧股骨生物力学性能:大载荷、结构硬度、能量吸收、大应力、弹性模量.MicroCT法分析右侧股骨骨微结构.结果 墨旱莲1.46 g/(kg·d)能显著升高模型组大鼠的血钙水平,同时降低尿钙、ALP、OCN和DPD(P ＜0.05)水平.与模型组相比,墨旱莲1.46 g/(kg·d)对维甲酸所致骨质疏松大鼠的股骨、第四椎骨及胫骨骨密度分别提高8.17％、11.79％、14.59％ (P ＜0.05),对大载荷、结构硬度、能量吸收、大应力、弹性模量等生物力学参数分别提高13.98％、16.33％、40.18％、12.45％、34.96％ (P ＜0.05),同时能有效抑制维甲酸所致大鼠股骨干骺端骨小梁微结构的退化(P＜0.05).结论 墨旱莲1.46 g/(kg·d)对维甲酸所致大鼠的骨质疏松症有防治作用,其作用机制可能与增强钙吸收、促进成骨细胞活性、降低骨转换率有关.
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墨旱莲乙醇提取物动物致色素作用和对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成的影响
目的选择离体实验中对黑色素合成的关键酶-酪氨酸酶(tyrosinase,TYR)有激活作用的墨旱莲(旱莲草),研究其动物致色素作用和对小鼠B16黑素瘤细胞黑素生成及相关基因[TYR、TYR相关蛋白(TRP-1/2)mRNA]表达的影响.方法以棕色豚鼠为动物模型,用Schmorl法染色,计数含黑素的细胞;用多巴(DOPA)-氧化酶染色,计算每100个基底细胞中DOPA阳性细胞数.培养的小鼠B16黑素瘤细胞以四甲基偶氮唑盐比色(MTT)法、氢氧化钠(NaOH)法和体外氧化DOPA反应方法分别测定细胞的增殖活性、黑素生成量及TYR活性;逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)测定TYR及其TRP-1/2基因的表达.结果墨旱莲乙醇提取物可使豚鼠表皮基底层中含黑素颗粒细胞增多,使豚鼠表皮内DOPA阳性细胞增多(P＜0.05);具有促进小鼠B16黑素瘤细胞黑素合成及TYR活性作用(P＜0.05),对细胞TYR基因有上调作用,而对TRP-1/2 mRNA的表达无明显作用.结论墨旱莲乙醇提取物具有促进黑素合成及上调酪氨酸酶基因表达的作用,对白癜风色素恢复有较好应用和开发的前景.
关键词： 墨旱莲 白癜风 豚鼠 小鼠B16黑素瘤细胞 黑素合成 酪氨酸酶 酪氨酸酶相关蛋白1/2
