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小檗皮水浸膏对db/db糖尿病小鼠视网膜病变的影响(Ⅱ)
目的:观察小檗皮浸膏对基因突变自然发病型db/db糖尿病小鼠视网膜蛋白激酶C-B(PKC-β),缺氧诱导因子-1α(HIF-1α),血管内皮细胞生长因子(VEGF)的影响,探索该药防治糖尿病视网膜病变的作用机制.方法:选用18周龄db/db糖尿病小鼠,db/m型同性同窝瘦型小鼠为对照.采用随机方法将db/db小鼠分为db/db组,小檗皮高、中、低剂量组(1.50,0.75,0.38 g·kg-1),羟苯磺酸钙组(0.23 g·kg-1),盐酸小檗碱组(0.135 g·kg-1).相关药物连续ig2个月,并于ig2个月末处死小鼠.采用免疫组化方法观察3种因子在视网膜结构的表达情况,实时荧光定量聚合酶链式反应(Real-time PCR)和蛋白质免疫印迹(Western blot)方法检测视网膜内3种因子的基因与蛋白表达.结果:与db/m组比较,db/db组视网膜组织PKC-β,VEGF免疫组化反应呈阳性,表达显著增加(P ＜0.01);HIF-1α免疫组化反应呈阳性,表达量有升高趋势,但差异无统计学意义;db/db组三种因子的基因与蛋白表达显著增加(P＜0.01).与db/db组比较,羟苯磺酸钙组视网膜组织PKC-β免疫组化反应呈阳性,表达显著降低(P＜0.05),小檗皮高剂量组视网膜组织PKC-β免疫组化反应呈阳性,表达显著降低(p＜0.01),其他各给药组较db/db组PKC-β表达有降低趋势,但差异无统计学意义;各给药组视网膜组织HIF-1α免疫组化反应呈阳性,表达有降低趋势,但差异无统计学意义;小檗碱组、小檗皮低剂量组视网膜组织VEGF免疫组化反应呈阳性,表达明显降低(P＜0.01),其他各给药组视网膜组织VEGF有降低趋势,但差异无统计学意义.与db/db组比较,羟苯磺酸钙组HIF-1α基因表达明显降低(P＜0.05),其他各给药组PKC-β,HIF-1α,VEGF基因表达有降低趋势,但差异无统计学意义.与db/db组比较,羟苯磺酸钙组、盐酸小檗碱组、小檗皮高、低剂量组PKC-β蛋白表达显著降低(P＜0.01),小檗皮中剂量组PKC-β蛋白表达有降低趋势,但差异无统计学意义;羟苯磺酸钙组、盐酸小檗碱组、小檗皮高、中剂量组HIF-1α蛋白表达显著降低(P＜0.01),小檗皮低剂量组HIF-1α蛋白表达量有降低趋势,但差异无统计学意义;各给药组VEGF蛋白表达显著降低(P＜0.01).结论:小檗皮浸膏防治db/db糖尿病小鼠视网膜病变的作用机制可能与抑制PKC-B,HIF-1α,VEGF表达有关.
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小檗皮水浸膏对db/db糖尿病小鼠视网膜病变的影响(Ⅰ)
目的:观察小檗皮浸膏对基因突变自然发病型db/db糖尿病小鼠视网膜病变的影响.方法:选用18周龄db/db糖尿病小鼠,db/m型同性同窝瘦型小鼠为对照.采用随机方法将db/db小鼠分为:db/db组,小檗皮高、中、低剂量(1.50,0.75,0.38 g·kg-1)组,羟苯磺酸钙(0.23 g·kg-1)组,盐酸小檗碱(0.135 g·kg-1)组.相关药物连续ig2个月,观察一般体征状态,每2周称体重1次,测空腹血糖水平1次,并于ig2个月末处死小鼠.苏木素和伊红(HE)染色观察视网膜常规病理改变,消化铺片观察微血管变化,计算视网膜血管内皮细胞/周细胞比值(E/P).结果:与db/m组比较,db/db组体重显著增加(P＜0.01),血糖水平显著升高(P＜0.01),视网膜血管E/P明显升高(P＜0.05),视网膜毛细血管充血扩张,视网膜损伤明显.与db/db组比较,羟苯磺酸钙组、小檗碱组、小檗皮各剂量组体重无显著变化;小檗碱组、小檗皮低剂量组血糖水平显著降低(P＜0.01),小檗皮高、中剂量组血糖水平明显降低(P＜0.05),羟苯磺酸钙组血糖水平无显著变化;小檗皮高剂量组视网膜血管E/P显著降低(P＜0.05),其他给药组E/P无显著变化;小檗皮各剂量组视网膜损伤减轻.结论:小檗皮对db/db糖尿病小鼠视网膜病变具有明显的防治作用,具有降低自发性糖尿病小鼠高血糖水平作用,改善视网膜微血管损害并阻止新生血管生成.
