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复方仙草颗粒对人肾足细胞保护作用的研究
目的 研究复方仙草颗粒对人肾足细胞的保护作用.方法 在体外培养人肾足细胞,实验分为4组:阿霉素组、雷公藤甲素组、地塞米松组、复方仙草颗粒组.采用MTT法检测细胞增殖,荧光技术观察细胞骨架的形态变化,Real-time PCR法检测细胞内nephrin、CD2AP mRNA的表达,蛋白质印迹技术观察细胞内nephrin、CD2AP的蛋白表达水平,流式细胞仪观察细胞内ROS水平.结果 与阿霉素组相比,复方仙草颗粒组人肾足细胞增殖速度明显增加,且具有一定的量效性和时效性;细胞骨架F-actin排列有序,荧光增强;细胞内ROS水平明显降低,足细胞相关蛋白nephrin和CD2AP表达明显提高.结论 复方仙草颗粒通过抑制ROS水平,上调足细胞相关蛋白nephrin和CD2AP的表达,维护细胞骨架,从而对人肾足细胞起到保护作用.
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复方仙草颗粒通过线粒体途径抑制肾足细胞凋亡的研究
目的:研究复方仙草颗粒对人肾足细胞凋亡的抑制作用及其作用机制.方法:采用阿霉素诱导肾足细胞凋亡,实验细胞分为5组:PBS组,阿霉素组,复方仙草颗粒低、中、高剂量组.采用MTT法检测复方仙草颗粒对肾足细胞增殖影响的量效性和时效性.实验细胞分为3组:PBS组、阿霉素组、复方仙草颗粒(高剂量)组(20％).采用倒置相差显微镜观察细胞结构、形态变化,FACS检测细胞凋亡率,Caspase-3活性分光光度法检测细胞内Caspase-3活性,Western blot法检测凋亡相关蛋白的表达情况.结果:经阿霉素处理的人肾足细胞,凋亡明显增多,而复方仙草颗粒干预后,细胞凋亡率显著下降,其抑制作用具有一定的时效性和量效性.细胞形态学观察到复方仙草颗粒组的人肾足细胞形态相对完整;与阿霉素组比较,复方仙草颗粒组的Caspase剪切小体(cleaved Caspase-3,cleaved Caspase-9)、cleaved PARP、Bax、Bid的表达受到抑制;而Caspase前体蛋白(Pro-Caspase-3,Pro-Caspase-9)、Bcl-2,Bcl-XL的表达明显增强.与此同时,细胞色素C向细胞浆的外漏现象明显受到抑制.结论:复方仙草颗粒有效抑制人肾足细胞凋亡,其机制可能与线粒体凋亡有关.
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复方仙草颗粒对IgA肾病小鼠IL-13及IL-17的影响
目的:观察复方仙草颗粒对IgA肾病(IgAN)小鼠的影响,探讨复方仙草颗粒对IgAN的治疗机制.方法:采用口服加皮下注射牛血清白蛋白,并联合应用葡萄球菌肠毒素B尾静脉注射的方法,建立小鼠IgAN模型,随机分为5组,给予复方仙草颗粒和强的松片进行治疗,以ELISA法检测各组小鼠血清及肾脏组织中IL-13、IL-17的含量变化.结果:与正常组比较,IgAN小鼠血清及肾脏组织中IL-13、IL-17水平均显著性升高(P＜0.01);与对照组比较,复方仙草颗粒高、中剂量组均能显著降低IgAN模型小鼠血清及肾脏组织中IL-13、IL-17水平( P＜0.05,P＜0.01).结论:复方仙草颗粒可显著抑制IgAN模型血清及肾脏组织中IL-13、IL-17的分泌,从而达到抑制IgAN炎症反应、抗系膜细胞增殖的作用.
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复方仙草颗粒防治大鼠IgA肾病实验研究
目的:观察中药制剂复方仙草颗粒对IgA肾病防治效果及可能作用机制.方法:采用切除一侧肾脏,反复尾静脉注射较大剂量葡萄球菌肠毒素B(SEB)的方法,制作IgA肾病大鼠实模型.随机分为模型组、福辛普利组[蒙诺冲剂液,含药0.33 g/mL,10mL/ (kg·d)]、复方仙草颗粒(由八仙草、三七、薏苡仁、制大黄、黄芪、甘草组成)小、中、大剂量组[复方仙草颗粒10、20、40g/ (kg·d)],另设正常对照组.疗程8周.检测大鼠24 h尿蛋白定量、尿红细胞计数；血清胱抑素C、血清肌酐；肾组织IgA(免疫荧光)、肾小球系膜细胞数及纤黏蛋白(FN,免疫化学法)表达.结果:(1)复方仙草颗粒各组及福辛普利组24 h尿蛋白定量、尿红细胞排泄率均较模型组明显改善(P＜0.01)；与福辛普利组比较,复方仙草颗粒大剂量组尿红细胞改善更显著(P＞0.05)；复方仙草颗粒中、大剂量组24 h尿蛋白定量与福辛普利组比较,差异无统计学意义(P＞0.05).(2)各药物干预组血清CystatinC与模型组比较,均明显改善(P＜0.05,P＜0.01)；复方仙草颗粒大剂量组血清CystatinC与福辛普利组比较,差异无统计学意义(P＞0.05)；各组大鼠间SCr差异无统计学意义(P＞0.05).(3)各药物干预组与模型组比较,肾小球系膜细胞数及FN表达均显著降低(P＜0.05,P＜0.01)；复方仙草颗粒中、大剂量组与福辛普利组比较,系膜细胞数差异无统计学意义(P＞0.05);复方仙草颗粒大剂量组与福辛普利组比较,FN表达差异亦无统计学意义(P＞0.05).结论:复方仙草颗粒能改善IgA肾痛大鼠血尿、蛋白尿,保护肾功能,其作用机制可能与减少IgA在肾组织沉积,抑制肾小球系膜细胞增殖及细胞外基质积聚有关.
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复方仙草颗粒对IgA肾病大鼠转化生长因子β1及其Ⅱ型受体表达的影响
目的 观察复方仙草颗粒对IgA肾病大鼠转化生长因子-β1(transforming growth factor β1,TGF-β1)信号通路的影响.方法 采用一侧肾切除、反复尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B的方法,复制IgA肾病大鼠模型.将大鼠随机分为模型组,福辛普利组,复方仙草颗粒小、中、大剂量组,另设正常对照组,每组10只.治疗8周后检测24 h尿蛋白、尿红细胞计数,采用RT-PCR法检测肾组织TGF-β1及其Ⅱ型受体(TβRⅡ)mRNA的表达,采用Western 印迹法检测TGF-β1及TβRⅡ蛋白的表达,采用免疫组织化学法检测纤连蛋白(fibronectin,FN)的表达.结果 与正常对照组比较,模型组24 h尿蛋白,尿红细胞计数,TGF-β1、TβRⅡ mRNA及其蛋白表达水平,以及FN表达水平显著升高(P＜0.01);复方仙草颗粒能够剂量依赖性地降低上述指标的水平,其中复方仙草颗粒大剂量组上述指标的水平显著低于小剂量组(P<0.05,或P<0.01),复方仙草颗粒大剂量组在降低24 h尿蛋白,TGF-β1 mRNA及其蛋白,以及FN方面与福辛普利组比较,差异无统计学意义(P>0.05).结论 复方仙草颗粒能延缓IgA肾病肾小球硬化,减轻血尿、蛋白尿,其作用机制可能与抑制TGF-β1信号通路有关.
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复方仙草颗粒对早期糖尿病肾病的影响研究
目的：通过观察复方仙草颗粒治疗早期糖尿病肾病临床疗效，评价该药的有效性及安全性，并探讨其作用机制。方法选取在广西中医药大学附属瑞康医院就诊的60例早期糖尿病肾病的患者（属于糖尿病肾病III期且中医辨证属脾肾亏虚，湿热瘀血），随机分为治疗组和对照组各30例，对照组采用西医常规治疗（降糖、适量运动、控制血压等），治疗组在对照组治疗的基础上加服复方仙草颗粒，两组共同疗程为12周。监测两组患者治疗前后尿液相关指标（ACR、UCyst C、UAER、Uβ2- MG）、血糖（FPG、2hPG、HbAlc）、血清同型半胱氨酸（Hcy）及心肌肌钙蛋白T（cTnT），同时观察患者治疗前后的临床体征及症状改善状况，比较两组治疗后的效果。结果治疗后两组患者取得较好的疗效，治疗组85.71%优于对照组55.17%（<0.05）。两组中医症候积分经过治疗后均有所下降（<0.05），但治疗组较对照组下降更为明显（<0.05）。两组治疗后ACR、UAER、Uβ2- MG及UCyst C均有所下降（<0.05），但治疗组较对照组下降更为明显（<0.05）。两组治疗后Hcy、cTnT均有所下降（<0.05），但治疗组较对照组下降更为明显（<0.05）。两组FPG、2hPG及HbAlc治疗后均有下降（<0.05），但两组FPG、2hPG及HbAlc治疗后比较差异无统计学意义（>0.05）。结论复方仙草颗粒可改善早期糖尿病肾病患者的中医证候积分，改善肾功能，减少尿白蛋白排泄，取得较好的临床疗效且并不依赖于血糖的控制。
