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非O1非O139群霍乱弧菌多重PCR和SYBR Green实时PCR检测方法的建立
目的 建立检测非O1非O139群霍乱弧菌的多重PCR和SYBR Grcen实时PCR方法.方法 分别以霍乱弧菌的外膜蛋白基因(ompW)、O1和O139群O抗原编码基因(rfb)设计引物,建立多重PCR和SYBR Green实时PCR方法,评价两种方法检测非O1非O139群霍乱弧菌的特异性、重复性和一致性及低检测菌量.结果 建立了检测非O1非O139群霍乱弧菌的多重PCR和SYBR Green实时PCR方法,根据特异性条带(多重PCR)和特异性熔解温度(SYBR Green实时PCR),两种方法均能特异性检测非O1非O139群霍乱弧菌,并能鉴别其他弧菌(5种)和肠道杆菌(3种);两种方法的低检测菌量分别为7×104 c fu/ml(多重PCR)和7×102 cfu/ml (SYBRGreen实时PCR),差异有统计学意义(P＜0.05);对实时PCR的重复性检测,批内变异系数(CV)为0.22％ ～ 0.92％,批间CV为0.27％～1.41％;经370株非O1非O139群霍乱弧菌的检测,两种方法的一致性均为100％.结论 建立的两种方法其特异性、敏感性及重复性均好,可适用于不同条件下非O1非O139群霍乱弧菌的检测和鉴定.
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非O1非O139群霍乱弧菌致肝硬化肝腹水患者感染败血症
目的 对从肝硬化肝腹水患者血液中感染的疑似霍乱孤菌进行实验室鉴定及药物敏感性试验.方法 调查回顾患者的临床症状、原发病、实验室检查结果、治疗和预后;用梅里埃Vitek 2Compact全自动细菌鉴定分析系统、手工微量管生化反应及聚合酶链式反应法鉴定细菌,采用K-B药敏纸片法进行药物敏感性测定,血清毒力鉴别用玻片凝集法确定.结果 经过系列试验鉴定为非O1非O139群霍乱弧菌,药物敏感性试验显示该菌对氨苄青霉素、哌拉西林、头孢他啶、头孢哌酮、舒巴坦、头孢曲松、头孢吡肟、亚胺培南、阿米卡星、氨曲南、左氧氟沙星、加替沙星、复方新诺明均敏感.结论 细菌为不产霍乱毒素的非O1非O139群霍乱弧菌,并对常用抗生素均敏感.
关键词： 非O1非O139群霍乱弧菌 肝硬化 血培养 败血症 -
肝硬化患者血液及腹水中检出3株非 O1非 O139群霍乱弧菌
霍乱弧菌是烈性肠道传染病--霍乱的病原菌，目前有155个血清群。自1817年以来，已发生7次世界性的霍乱大流行，均由霍乱弧菌的 O1群引起［1］。非 O1非 O139群霍乱弧菌（non-O1 non-O139 Vibrio choleraev，NOVC）虽尚未引起世界性流行，但也可引起人类腹泻及肠道外感染，如伤口感染、败血症等，国内、外已有关于从血液中分离出 NOVC 的报道。2012年7月河池市人民医院从2例肝硬化患者血液及腹水中检出3株NOVC。
关键词： 非O1非O139群霍乱弧菌 肝硬化 血液 腹水
