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SV40 T文献资料
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大鼠成骨细胞系ROB-1的建立及氟对其DNA损伤的实验研究
目的建立永生化大鼠成骨细胞系ROB-1并探讨氟对其DNA的损伤.方法用酶消化法原代分离SD胎鼠颅骨成骨细胞,用Lipofect AMINE作载体对其转染SV40大T基因,并经PCR法鉴定大T基因整合情况.采用碱性磷酸酶染色法鉴定转染细胞系中成骨细胞的纯度;采用单细胞凝胶电泳(SCGE)方法检测2.0～3.0 mmol/L氟化钠染毒24h对成骨细胞DNA损伤情况.结果转染后成骨细胞的基因组中整合有SV40 T基因,碱性磷酸酶染色阳性细胞占95%以上;单细胞凝胶电泳发现NaF可不同程度地诱导细胞DNA链断裂,与溶剂对照组相比,各剂量组DNA断裂细胞百分率及其彗尾长度均有统计学意义的增加(P＜0.05).结论建立了永生化大鼠成骨细胞系ROB-1;氟对成骨细胞DNA有损伤作用.
