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高效液相色谱-串级质谱(HPLC-MS/MS)文献资料
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间隙连接蛋白Cx31.1相互作用蛋白的初步鉴定
目的:筛选间隙连接蛋白31.1(Cx31.1)的相互作用蛋白,进一步阐释Cx31.1在生殖健康方面可能的作用机制.方法:采用免疫共沉淀技术富集稳定表达Cx31.1-EGFP融合蛋白细胞中的Cx31.1结合蛋白,以稳定表达EGFP标签蛋白的细胞作为对照组.得到的蛋白复合物直接酶解后进行高效液相色谱-串级质谱(HPLC-MS/MS)分析,通过相应的肽段序列标签在Swiss Prot数据库中搜索蛋白质.结果:通过数据库搜索首次鉴定了5个与生殖相关的且与Cx31.1可能发生相互作用的蛋白,分别是HSPB1、HSPA2、HSPA5、BYP2和XAGE1A.其中HSPB1、HSPA2和HSPA5属于热休克蛋白家族,BYP2和XAGE1A蛋白在睾丸组织中特异表达.结论:Cx31.1可能与生殖相关蛋白具有相互作用.
