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抗伴放线放线杆菌IgY的制备及抑菌试验研究
目的:观察伴放线放线杆菌诱导母鸡产生特异性IgY抗体情况,以及其抑制伴放线放线杆菌(A.a)和牙龈二氧化碳噬纤维菌(C.g)生长效果.方法:应用免疫接种法、水稀释法、盐析法、液体培养抑菌法、以及ELISA法,诱导、提取和纯化IgY抗体,取一定量抗体与细菌共同培养,测定抑制伴放线放线杆菌和牙龈二氧化碳噬纤维菌生长效果.结果:两步硫酸铵盐析沉淀的IgY抗体纯度达85.6%~90.3%;抗原结合效价为1∶ 32 000;抗伴放线放线杆菌IgY抗体与牙龈二氧化碳噬纤维菌交叉免疫反应的抗原结合效价为1∶ 8 000;当抗伴放线放线杆菌IgY抗体浓度在5.0、1.0、0.1 g/L时,细菌浓度在5×108 CFU/L培养24 h其抑菌率分别为31.60%(P=0.004)、10.24%(P=0.024)、-3.30%,培养72 h其抑菌率分别为64.20%(P=0.004)、53.21%(P=0.002)、11.20%.细菌浓度在1×108 CFU/L培养24 h其抑菌率分别为35.71%(P=0.004)、30.95% (P=0.012)、11.11%,培养72 h其抑菌率分别为65.11%(P=0.005)、54.04%(P=0.002)、16.17%;5.0 g/L的抗伴放线放线杆菌IgY与1×108 CFU/L牙龈二氧化碳噬纤维菌培养24 h其抑菌率为41.61%(P=0.005),培养72 h抑菌率为86.99%(P=0.014).结论:伴放线放线杆菌能够诱导母鸡产生高效价的特异性IgY抗体,该抗体在一定的浓度内有抑制伴放线放线杆菌和牙龈二氧化碳噬纤维菌生长的作用;伴放线放线杆菌与牙龈二氧化碳噬纤维菌存在着共同抗原.
关键词: 伴放线放线杆菌 牙龈二氧化碳噬纤维菌 免疫球蛋白Y 细菌抑制 -
抗牙龈卟啉单胞菌IgY的制备及抑菌效果
目的:使用牙龈卟啉单胞菌(P.g)诱导产蛋母鸡特异性IgY抗体产生及制备,特异性IgY抗体抑制P.g及其它牙周病病因菌生长.方法:采用免疫接种、水稀释、盐析、液体培养抑菌及ELISA等方法,诱导、提纯IgY抗体,抑制P.g及其它牙周病病因菌生长.结果:诱导产生的IgY抗体经硫酸铵盐析提取纯度达87.6%~89.1%,IgY特异性结合牙龈卟啉单胞菌抗原的结合效价1∶ 1 600.制备的抗牙龈卟啉单胞菌IgY抗体与牙龈二氧化碳噬纤维菌、中间普氏菌、伴放线放线杆菌、具核梭杆菌等牙周病致病菌的交叉免疫反应抗原结合效价分别为1∶ 800、1∶ 800、1∶ 6 400、1∶ 12 800.抗牙龈卟啉单胞菌IgY在5.0、1.0、0.1 g/L时,分别与牙龈卟啉单胞菌、牙龈二氧化碳噬纤维菌、伴放线放线杆菌、中间普氏菌、具核梭杆菌、粘性放线菌、变形链球菌等厌氧菌在(1×108) CFU/L和(5×108) CFU/L时培养24 h和72 h均有不同程度的抑制其生长作用.结论:牙龈卟啉单胞菌免疫产蛋母鸡诱导产生的特异性IgY抗体在一定的浓度内有抑制牙龈卟啉单胞菌生长,以及抑制多种牙周病致病菌生长的作用.牙龈卟啉单胞菌与这些牙周病病因均存在着共同抗原,其可能具有防治牙周病的前景.