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Nucleofector Kit文献资料
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大鼠胚胎原代海马神经元两种转染方法的比较
目的:原代海马神经元是原代细胞中比较难转染的细胞,为了得到比较高的转染效率,通过比较Li-pofectamine2000转染法和大鼠神经元核电转法(rat neuron nucleofector kit)转染效率及转染前后细胞的存活率,来探讨Nucleofector Kit核电转法的高效性.方法:选取胚胎18 d (E18)大鼠的海马神经元进行原代培养,获取海马神经元单细胞悬液后,于种植前和种植24 h后分别采用Nucleofector Kit和Lipofectamine 2000转染红色荧光蛋白(red fluorescence protein,DsRed)质粒.神经元转染48 h后分别采用轴突标记物Tau -1进行免疫荧光染色鉴定神经元.神经元的存活率采用台盼兰进行检测.结果:Lipofectamine2000的基因转染率仅为5.34％,而大鼠神经元Nucleofector Kit的转染率为44.54％,后者为前者的8.34倍.Lipofectamine2000转染细胞前后的存活率分别为98.56％和91.44％,而Nucleofector Kit组分别为98.26％和74.02％.结论:大鼠神经元核电转法能高效稳定的转染原代海马神经元.
