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VP22羧基端文献资料
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抗MDV-1 VP22羧基端单克隆抗体的制备与免疫学特性鉴定
目的:制备抗血清I型马立克氏病病毒(MDV-1)VP22的单克隆抗体(mAb), 并鉴定其免疫学特性.方法:在原核系统中表达VP22 羧基端区域(94～243aa), 获得融合表达产物GST-VP22C.将该表达产物切胶免疫小鼠, 利用杂交瘤技术制备抗MDV-1 VP22C的mAb, 并通过ELISA、间接免疫荧光(IFA)、 Western blot鉴定其特性.结果:获得了2株可稳定分泌抗MDV-1 VP22C的mAb的杂交瘤细胞, 命名为3F7、 4E4.IFA鉴定表明, 两株mAb均能与感染MDV-1的成纤维细胞反应, 其中, 3F7 mAb染色呈现MDV空斑, 而4E4 mAb呈现整个单层的细胞核荧光.ELISA和Western blot分析表明, 3F7能与杆状病毒表达的VP22反应, 4E4不具备该特性.对3F7 mAb进一步鉴定, 确定了该mAb针对的具体位置在94～193aa处, 是蛋白转导域的预测位置.结论:成功地制备了抗MDV-1 VP22C的mAb, 为深入研究VP22蛋白的转导功能提供了有用的试剂.
