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青霉噻唑基文献资料
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抗青霉素单克隆抗体的制备及初步应用
目的:制备抗青霉素的单克隆抗体(mAb)并建立双抗体夹心ELISA检测方法, 对临床上引起青霉素过敏反应的过敏原青霉噻唑蛋白进行研究.方法:将半抗原青霉素和载体蛋白偶联后免疫BALB/c小鼠, 应用杂交瘤技术建立稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株.常规制备腹水, 用辛酸-硫酸铵法纯化, 并对纯化的mAb进行特异性鉴定.通过对不同抗体组合的分析和条件的优化, 建立检测过敏原的双抗体夹心ELISA方法.结果:经细胞融合、筛选及克隆化, 共获得9株稳定分泌抗青霉素mAb的杂交瘤细胞株, 其中5株亲和力较高.建立了双抗体夹心ELISA相对定量检测方法, 该方法灵敏度达到870U/L, 平均回收率为107.81%, 批内变异系数平均为6.7%, 批间变异系数平均为9.3%, 可用于A群链球菌制剂中青霉噻唑蛋白的检测.结论:成功地制备了抗青霉素的mAb, 并建立了相对定量检测青霉噻唑蛋白的双抗体夹心ELISA法.
关键词： 青霉素 青霉噻唑基 单克隆抗体 双抗体夹心ELISA
