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浸润性膀胱癌组织中E2F3表达与CD8+T细胞浸润数量的相关性分析
目的 探讨膀胱癌组织中E2F转录因子3(E2F3)表达与CD8+T细胞浸润的特点及其与膀胱癌恶性生物学行为之间的相关性.方法 采用免疫组织化学染色法检测110例不同病理分期、分级的膀胱癌组织和相应正常膀胱组织中E2F3的表达情况及CD8+T细胞浸润特征,Western blot法检测82例膀胱癌组织及相应正常膀胱组织中E2F3、CD8蛋白水平,直线相关分析方法分析E2F3表达与CD8+T细胞浸润的相关性.结果 膀胱癌组织中E2F3高表达,膀胱癌组织中E2F3表达随肿瘤分期、分级增加逐步增高,而相应肿瘤内CD8+T细胞浸润数目逐步减少,E2F3高表达组肿瘤内CD8+T细胞浸润数目显著低于E2F3低表达组.E2F3阳性率及CD8+T细胞的浸润数量减少与肿瘤病理分期、分级、肿瘤大小、伴有淋巴结转移或远处转移等肿瘤临床侵袭性指标密切相关.相关性分析显示肿瘤E2F3表达水平与肿瘤内CD8+T细胞浸润数目呈负相关.生存分析表明E2F3高表达患者术后5年预后更差.结论 膀胱癌组织中E2F3水平与肿瘤侵袭性关系密切,与肿瘤内CD8+T细胞浸润数量呈负相关.
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miR-503-5p通过干扰Rb/E2F信号通路抑制膀胱癌T24和EJ细胞的增殖
目的 研究微小RNA-503-5p (miR-503-5p)对膀胱癌T24细胞和EJ细胞生长的影响和机制.方法 T24细胞和EJ细胞转染miR-503-5p模拟物或阴性对照微小RNA (miR-NC)并验证转染效率,生物信息学软件预测miR-503-5p的靶基因.通过荧光实时定量PCR检测miR-503-5p靶基因E2F转录因子3(E2F3)及下游基因mRNA的表达水平,Western blot法检测视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)/E2F信号通路蛋白E2F3、细胞周期蛋白E(cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、Rb和磷酸化的Rb(p-Rb)蛋白水平,流式细胞术检测膀胱癌细胞周期的变化,MTT法和平板克隆形成实验检测膀胱癌细胞的增殖能力.结果 转染miR-503-5p模拟物后,膀胱癌细胞中miR-503-5p的水平显著增加.过表达miR-503-5p可明显降低膀胱癌细胞中E2F3mRNA及Rb/E2F信号通路基因的表达水平,将膀胱癌细胞周期阻滞于G0/G1期,膀胱癌细胞的增殖能力明显降低.结论 过表达miR-503-5p通过干扰Rb/E2F信号通路的转导,抑制膀胱癌细胞的增殖.
