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微小RNA-503-5p(miR-503-5p)文献资料
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miR-503-5p通过干扰Rb/E2F信号通路抑制膀胱癌T24和EJ细胞的增殖
目的 研究微小RNA-503-5p (miR-503-5p)对膀胱癌T24细胞和EJ细胞生长的影响和机制.方法 T24细胞和EJ细胞转染miR-503-5p模拟物或阴性对照微小RNA (miR-NC)并验证转染效率,生物信息学软件预测miR-503-5p的靶基因.通过荧光实时定量PCR检测miR-503-5p靶基因E2F转录因子3(E2F3)及下游基因mRNA的表达水平,Western blot法检测视网膜母细胞瘤蛋白(Rb)/E2F信号通路蛋白E2F3、细胞周期蛋白E(cyclin E)、细胞周期蛋白依赖激酶2(CDK2)、Rb和磷酸化的Rb(p-Rb)蛋白水平,流式细胞术检测膀胱癌细胞周期的变化,MTT法和平板克隆形成实验检测膀胱癌细胞的增殖能力.结果 转染miR-503-5p模拟物后,膀胱癌细胞中miR-503-5p的水平显著增加.过表达miR-503-5p可明显降低膀胱癌细胞中E2F3mRNA及Rb/E2F信号通路基因的表达水平,将膀胱癌细胞周期阻滞于G0/G1期,膀胱癌细胞的增殖能力明显降低.结论 过表达miR-503-5p通过干扰Rb/E2F信号通路的转导,抑制膀胱癌细胞的增殖.
