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牙龈卟啉单胞菌对兔血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响
目的 研究牙龈卟啉单胞菌(P.gingivalis)上清液对兔血管平滑肌细胞增殖和迁移的影响.方法 组织块法进行兔腹主动脉VSMCs的原代培养,复苏培养P.gingivalis标准菌株,不同浓度细菌上清液刺激细胞48h,MTT法检测细菌上清液对细胞增殖的影响;爬片法检测7d内4.3×106 CFU/mL的P.gingivalis上清对细胞迁移的影响.结果 浓度高于4.3×106 CFU/mL的P.gingivalis上清液能抑制VSMCs的增殖;4.3×106 CFU/mLP.gingivalis上清作用于VSMCs前4d能促进VSMCs的迁移,明显高于对照组(P<0.05).结论 高于4.3×106 CFU/mL的P.gingivalis上清液能抑制VSMCs的增殖,4.3×106 CFU/mL P.gingivalis上清液可促进血管平滑肌早期的迁移,从而在动脉粥样硬化的发生发展过程中可能发挥一定的作用.
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牙龈卟啉单胞菌对兔血管平滑肌细胞分泌IL-1β、IL-6的影响
目的:观察牙龈卟啉单胞菌(Porphyromonas gingivalis,Pg)上清液对体外培养的兔血管平滑肌细胞分泌IL-1β、IL-6的影响.方法:组织块法培养兔腹主动脉血管平滑肌细胞,并对其细胞来源进行鉴定.用4.3×106 CFU/mL的Pg上清液刺激细胞12、24、48h后,通过ELISA检测IL-1β、IL -6的水平;同时用RT-PCR检测其mRNA表达的情况.结果:Pg上清液刺激24h和48 h时能促进血管平滑肌细胞分泌IL-6,分别与同一时间点的对照组相比差异均有统计学意义(P<0.05),而且24 h时,IL-6表达强,而IL-1β的表达低,明显低于相同时间的对照组和其他时间点的实验组(P<0.05).RT-PCR检测显示,4.3×106 CFU/mL的Pg 上清刺激血管平滑细胞12、24、48 h后细胞内均有IL - 1β、IL-6的基因表达,在24 h时,血管平滑肌细胞的IL-Iβ基因表达减少,而IL-6基因表达增加.结论:Pg上清液可促进细胞合成和分泌IL-6,在动脉粥样硬化的发生发展过程中可能发挥一定作用.