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非结构蛋白编码区文献资料
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甲病毒表达载体的特点及在核酸疫苗中应用
甲病毒属(Alphavirus)在病毒分类学上被归属于披膜病毒科(Togaviridae).可以在蚊、禽类和哺乳动物的宿主细胞中复制.甲病毒基因组是一条单股正链RNA,其5′端为非结构蛋白编码区(NS1-NS4),可编码病毒自身复制酶,主要与病毒的自身转录和复制有关.病毒感染宿主细胞或病毒基因组RNA转染细胞后,均可启动高水平的复制过程,迅速产生新的子代病毒颗粒,可在每个宿主细胞内达到105的高拷贝数[1].甲病毒在复制过程中,NS1-NS4序列首先翻译合成为一种能进行自身水解的多聚蛋白.多聚蛋白前体经自身剪切后形成4个非结构蛋白(NSP1-4).它们是自身转录和复制所需要的酶,启动自身RNA的复制.在这些酶蛋白的作用下,以正链RNA为模板,合成全长的负链RNA,再以负链RNA为模板合成子代基因组正链RNA和编码病毒结构蛋白的mRNA,经过翻译合成病毒的结构蛋白.在此过程中,以正链RNA为模板合成全长的负链RNA的反应可持续不断的进行,从而可以转录出大量的结构蛋白编码基因的mRNA拷贝,指导合成出大量的蛋白.倘若用编码抗原的目的基因取代结构蛋白基因,则可构成强大的以复制酶为基础的核酸疫苗.以上的病毒生物学特点促使学者研究将甲病毒作为一种具有独特功能优势的基因工程载体.
