首页 > 文献资料
-
补体片段C3a对体外培养足细胞表型的影响
目的 探讨补体片段C3a对小鼠足细胞表型转化的影响.方法 外源性C3a干预分化成熟的足细胞,用RT-PCR、Western印迹、免疫化学和免疫荧光方法检测足细胞synaptopodin、podocin、nephrin、CD2相关蛋白(CD2AP)、成纤维细胞特异性蛋白1(FSP-1)、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA) mRNA和蛋白的表达.经整合素连接激酶(ILK) siRNA预处理后的足细胞再加入外源性C3a干预,用Western印迹检测nephrin和α-SMA蛋白的表达,Western印迹和免疫化学方法检测Snail和α-actinin 4蛋白的表达,细胞划痕实验观察足细胞体外迁移能力.结果 免疫化学和免疫荧光检测结果显示,分化成熟足细胞表达synaptopodin、podocin、nephrin、CD2AP,0.1 μmol/L C3a刺激24 h后其表达减少;分化成熟足细胞表达少量FSP-1、α-SMA,0.1 μmol/L C3a刺激24h后其表达增加.与对照组相比,随着C3a浓度的增加synaptopodin、podocin、CD2AP和nephrin的mRNA表达减少(均P＜0.05),FSP-1和α-SMA的mRNA表达增加(均P＜0.05).Western印迹结果显示,与对照组相比,随着C3a浓度增加,足细胞synaptopodin、podocin、nephrin、CD2AP的蛋白表达减少(均P＜0.05),FSP-1、α-SMA的蛋白表达增加(均P＜ 0.05).与C3a直接干预组比较,足细胞经ILK siRNA预处理后再加入外源性C3a,nephrin蛋白表达增加(P＜0.05),α-SMA蛋白表达减少(P＜0.05);同时,α-actinin 4和Snail的蛋白表达减弱,足细胞迁移能力下降.结论 补体片段C3a可诱导体外培养的小鼠足细胞向间充质细胞转化,ILK信号通路参与细胞表型的转化.
关键词： 补体C3a 足细胞 上皮-间充质转分化 整合素连接激酶信号通路
